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转基因玉米PCR检测体系的优化研究

何春梅 张成华 刘强 董瑞 高新学 汪黎明 刘铁山

山东农业科学Issue(6):14-16,19,4.
山东农业科学Issue(6):14-16,19,4.

转基因玉米PCR检测体系的优化研究

Optimization of PCR System for Transgenic Maize

何春梅 1张成华 1刘强 1董瑞 1高新学 1汪黎明 1刘铁山1

作者信息

  • 1. 山东省农业科学院玉米研究所,山东济南250100
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摘要

Abstract

With the transgenic maize as experiment material, the PCR system for detecting exogenous gene was optimized in extracted DNA quality, Mg2 + concentration, annealing temperature and primer dosage. In the optimized system, the dosage of 25 mmol/L Mg2 + was reduced from 1. 5 μl to 1. 2 μl; the dosage of 12.5 mmol/L primer was reduced from 1 μl to 0.5 μl; the annealing temperature was increased by 2℃. The Touchdown PCR reaction conditions were 95 ℃ for 5 min; 95℃ for 1 min, 62.5℃ for 1 min (1℃ decreased after each cycle), 72℃ for 1 min, 15 cycles; 95℃ for 1 min, 57.5℃ for 1 min, 72℃ for 1 min, 20 cycles; and 72℃ for 7 min for final extension.

关键词

转基因玉米;RCR扩增;反应体系

Key words

Transgenic maize/PCR amplification/Reaction system

分类

生物科学

引用本文复制引用

何春梅,张成华,刘强,董瑞,高新学,汪黎明,刘铁山..转基因玉米PCR检测体系的优化研究[J].山东农业科学,2011,(6):14-16,19,4.

基金项目

国家科技支撑计划项目(2007BAD31B03)、山东省良种工程项目资助. (2007BAD31B03)

山东农业科学

OACSTPCD

1001-4942

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