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大豆过氧化物酶基因随机突变文库的构建

曾家豫 郑群 廖世奇 王黎 袁红霞 杨海棠 张丽琼 张宁

大豆科学2011,Vol.30Issue(5):731-737,7.
大豆科学2011,Vol.30Issue(5):731-737,7.

大豆过氧化物酶基因随机突变文库的构建

Construction of Soybean Peroxidase Gene Random Mutation Library

曾家豫 1郑群 1廖世奇 2王黎 2袁红霞 2杨海棠 1张丽琼 3张宁3

作者信息

  • 1. 西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州730070
  • 2. 甘肃省医学科学研究院,甘肃兰州730050
  • 3. 兰州理工大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730050
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摘要

Abstract

In order to improve enzymatic activity of soybean peroxidase(SBP)and study the correlation between its primary structure and enzymatic activity,sequential error-prone PCR method was used on soybean peroxidase genes(sbp) for two times randon mutation. The second round error-prone PCR products and plasmid vectors pPICZα-A were digested by double enzymes. After the PCR products ligated into the vectors by T4DNA ligase,recombinant plasmids pPICZa-A-sbp were transformed into Escherichia coli DH5ct through calcium chlorid method. A random mutation library was constructed,and the capacity was about 1.77 ×106 cfu.

关键词

大豆过氧化物酶/易错PCR/基因文库/随机突变/酶定向进化

Key words

Soybean peroxidase/Error-prone PCR/Gene library/Random mutation/Directed evolution of enzymes

分类

农业科技

引用本文复制引用

曾家豫,郑群,廖世奇,王黎,袁红霞,杨海棠,张丽琼,张宁..大豆过氧化物酶基因随机突变文库的构建[J].大豆科学,2011,30(5):731-737,7.

基金项目

甘肃省教育厅资助项目(0601-28,0501B-16) (0601-28,0501B-16)

甘肃省自然科学基金资助项目(096RJZA035) (096RJZA035)

甘肃省高分子材料重点实验室开放课题资助项目(KF-06-01). (KF-06-01)

大豆科学

OA北大核心CSCDCSTPCD

1000-9841

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