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桉树随机引物PCR反应体系优化研究

邓紫宇 张照远 项东云 唐庆兰 陈健波 卢翠香 叶露

广西林业科学2012,Vol.41Issue(1):23-26,4.
广西林业科学2012,Vol.41Issue(1):23-26,4.

桉树随机引物PCR反应体系优化研究

The Study on Optimization of Arbitrary-primer PCR Reaction System in Eucalypt

邓紫宇 1张照远 2项东云 3唐庆兰 2陈健波 2卢翠香 2叶露2

作者信息

  • 1. 广西大学林学院,南宁530000/广西林业科学研究院国家林业局中南速生材繁育实验室广西优良用材林资源培育重点实验室,南宁530002
  • 2. 广西林业科学研究院国家林业局中南速生材繁育实验室广西优良用材林资源培育重点实验室,南宁530002
  • 3. 广西大学林学院,南宁530000/广西林业科学研究院国家林业局中南速生材繁育实验室广西优良用材林资源培育重点实验室,南宁530002/南京林业大学森林资源与环境学院,南京210037
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摘要

Abstract

Using DNA of Eucalypt as template,the effect of dNTP concentration,Mg2+ concentration and annealing temperature on the response of Arbitrary-primer PCR was examined by applying single factor experimenting method.The results demonstrated that the optimal condition of reaction for Eucalypt was 2.0 μL Buffer(10 x),1.28 μL Mg2+(25 mmol/L),0.4 μL dNTP(10 mmol/L),2.0 μL Primer(10 μmol/L),0.2 μL Taq(5 U/μL),2.0 μL DNA.The optimization of the amplification process consisted of a pre-denaturation step at 94℃ for 2 minutes,followed by 35 cycles of denaturation at 94℃/30 s,annealing at 36℃/30 s and extension at 72℃/2 min,plus a final extension of 10 min at 72°C.

关键词

桉树/随机引物PCR/体系优化

Key words

eucalypt/arbitrary-primer PCR/reaction system optimization

分类

农业科技

引用本文复制引用

邓紫宇,张照远,项东云,唐庆兰,陈健波,卢翠香,叶露..桉树随机引物PCR反应体系优化研究[J].广西林业科学,2012,41(1):23-26,4.

基金项目

广西林科院基本科研业务费项目 ()

广西科技攻关与新产品试制项目 ()

广西林业科技攻关项目 ()

广西林业科学

1006-1126

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