猪IFN-β和IRF-3基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立OA北大核心CSCDCSTPCD
Establishment of a Real-time Fluorescent Quantitative RT-PCR Assay for Detection of Porcine IFN-β and IRF-3 genes
为建立猪IFN-β及IRF-3基因实时荧光定量PCR检测方法,依据GenBank中IFN-β和IRF-3基因的保守序列,设计并合成各自特异性引物,并以β-actin为内参基因,采用SYBRGreen-Ⅰ为染料,建立实时荧光定量检测方法.提取猪肺泡巨噬细胞总RNA,经反转录得cDNA,用特异性引物经PCR扩增得到IFN-β和IRF-3基因,将其克隆至pMD-19T载体,经测序鉴定后得重组质粒,依次10倍稀释做为标准品,建立标准曲线及溶解曲线.结果表…More>>
To establish real-time fluorescent quantitative RT-PCR assays for detecting porcine IFN-β and IRF-3, sevral specific primer pairs were designed according to the porcine's IFN-β and IRF-3 gene sequences available in GenBank,and the porcine β-actin gene was used as an internal gene control. The total RNA was extracted from porcine alveolar macrophages. The reverse transcriptase PCR was used to obtain the first strand cDNA. Fragments for IFN-β and IRF-3 w…More>>
王蕊;张改平;乔松林;刘永晖;蒋志政;万博;鲍登克;王爱萍
郑州大学生物工程系,河南郑州450001河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002郑州大学生物工程系,河南郑州450001河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002郑州大学生物工程系,河南郑州450001河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002
农业科技
猪实时荧光定量PCRIFN-β基因IRF-3基因
porcine real-time fluorescent quantitative PCRf IFN-β gene IRF-3 gene
《河南农业科学》 2012 (5)
猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体依赖增强作用及免疫抑制的分子机制
137-140,144,5
国家自然科学基金项目(30730068)河南省重大科技攻关计划项目(082101510002)