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赤羽病SYBR Green I实时荧光PCR方法的建立和应用OA

Development and Application of SYBR Green I Real-time PCR Assay for Detecting Akabane virus

中文摘要英文摘要

本研究根据赤羽病毒(AKAV)的S基因序列设计合成了引物, RT-PCR扩增得到目的基因片段并克隆到PGM-T载体得到质粒标准品。通过对荧光定量PCR反应条件的优化,建立了SYBR Green I荧光定量PCR检测AKAV的方法。该方法的检测敏感性达到926拷贝/25μL,并具有较好的重复性和特异性。本试验方法的建立对于加强进出口牛AKAV的检验检疫具有十分重要的意义。

In the study, the primers were designed and synthesized according to the conservative S se-quence of AKAV. The genes were amplified by reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) and cloned to the PGM-T vector. The reaction parameters were optimized to develop SYBR Green I fluores-cence quantitative PCR assay. It was shown that the fluorescence quantitative PCR assay could detect 926 copies/25μL of plasmid DNA and its specificity and reproducibil…查看全部>>

陈圣军;孔繁德;徐淑菲;张吉红;唐泰山

集美大学生物工程学院,福建厦门 361021 厦门出入境检验检疫局,福建厦门 361026厦门出入境检验检疫局,福建厦门,361026厦门出入境检验检疫局,福建厦门,361026宁波出入境检验检疫局,浙江宁波,315012

农业科技

AKAV实时荧光定量PCRSYBR Green I

AKAVReal-time PCRSYBR Green I

《中国动物检疫》 2013 (8)

70-74,5

福建省自然科学基金科技计划项目(2010IK016);厦门市科技计划项目(3502Z2010012);宁波市科技计划项目(2007C10057)和国家质检总局科技计划项目(2005IK049)

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