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基于荧光检测的糜子 Genic-SSR PCR 体系优化

李耀深 曹鑫 段明 王俊杰 张彬 李红英 侯思宇 韩渊怀

山西农业大学学报(自然科学版)2016,Vol.36Issue(7):477-482,6.
山西农业大学学报(自然科学版)2016,Vol.36Issue(7):477-482,6.

基于荧光检测的糜子 Genic-SSR PCR 体系优化

The optimization of PCR reaction system for Genic-SSR analysis in broomcorn millet

李耀深 1曹鑫 1段明 1王俊杰 1张彬 1李红英 1侯思宇 1韩渊怀2

作者信息

  • 1. 山西农业大学 农学院,山西 太谷,030801
  • 2. 杂粮种质资源发掘与遗传改良山西省重点实验室,山西 太谷,030801
  • 折叠

摘要

Abstract

Objective]The fluorescent PCR reaction system for Genic-SSR analysis was optimized by using the Frag-ment Analyzer Automatic Capillary Electrophoresis detection system in broomcorn millet.[Methods]Optimization was based on L1 6 (4 4 )orthogonal design,with different concentrations of Taq DNA Polymerase,Mg2+ ,dNTPs and prim-ers.[Results]The order of the effects for the system was:Mg2+ >primer>dNTPs>Taq DNA Polymerase.Through the orthogonal experimental design,a 20 μL reaction system was established,which contained a 0.2 mol·L-1 dNTPs, 0.2 μmmol·L-1 SSR primer,1.5 mmol·L-1 Mg2+ ,and 0.5 U Taq DNA Polymerase.[Conclusion]This optimal PCR reaction system could be used for genetic clustering analysis of germplasm with Genic-SSR markers and for further de-velopment of molecular markers for marker-assisted breeding in broomcorn millet.

关键词

糜子/Genic-SSR/体系优化/正交试验设计

Key words

Broomcorn millet/Genic-SSR/PCR reaction system/Orthogonal design

分类

农业科技

引用本文复制引用

李耀深,曹鑫,段明,王俊杰,张彬,李红英,侯思宇,韩渊怀..基于荧光检测的糜子 Genic-SSR PCR 体系优化[J].山西农业大学学报(自然科学版),2016,36(7):477-482,6.

基金项目

山西农业大学科技创新育种基金(2013-2016) (2013-2016)

山西特色植物基因资源开发与利用平台项目(2012091004-0103) (2012091004-0103)

山西农业大学学报(自然科学版)

OACSTPCD

1671-8151

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