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基于 CRISPR/Cas9系统的 OsbHLH116基因编辑及其脱靶效应分析OA北大核心CSCDCSTPCD

CRISPR/Cas9 System-based Editing of OsbHLH116 Gene and Its Off-target Effect Analysis

中文摘要英文摘要

以水稻 OsbHLH116基因为编辑对象,根据基因编码区序列(CDS)在第一外显子区域设计长度为19 bp 的 sgRNA,化学合成 sgRNA 的寡核苷酸序列,然后与 CRISPR/Cas9系统表达载体 pBUN411连接,再用农杆菌介导法获得水稻转基因株系,最后利用酶切和测序相结合的方法对 OsbHLH116突变体进行了筛选鉴定和脱靶效应分析。结果表明,所构建的pBUN411-gRNA 载体成功实现了对基因 OsbHLH116的定向编辑。酶切…查看全部>>

With OsbHLH1 1 6 as the editable object,the 1 9-bp sgRNA was designed in the exon 1 site according to the coding sequence (CDS)and the oligonucleotides of sgRNA were chemically synthesized and inserted into linearized plasmid pBUN41 1 . The transgenic lines were obtained by Agrobacterium-mediated transformation method. Identification of mutants and off-target effects analysis of OsbHLH1 1 6 were conducted by combing restriction enzyme digestion with sequenci…查看全部>>

杜彦修;季新;陈会杰;彭廷;张静;李俊周;孙红正;赵全志

河南农业大学 农学院/河南粮食作物协同创新中心/河南省水稻生物学重点实验室,郑州 450002河南农业大学 农学院/河南粮食作物协同创新中心/河南省水稻生物学重点实验室,郑州 450002河南农业大学 农学院/河南粮食作物协同创新中心/河南省水稻生物学重点实验室,郑州 450002河南农业大学 农学院/河南粮食作物协同创新中心/河南省水稻生物学重点实验室,郑州 450002河南农业大学 农学院/河南粮食作物协同创新中心/河南省水稻生物学重点实验室,郑州 450002河南农业大学 农学院/河南粮食作物协同创新中心/河南省水稻生物学重点实验室,郑州 450002河南农业大学 农学院/河南粮食作物协同创新中心/河南省水稻生物学重点实验室,郑州 450002河南农业大学 农学院/河南粮食作物协同创新中心/河南省水稻生物学重点实验室,郑州 450002

生物科学

水稻基因编辑CRISPR/Cas9脱靶效应OsbHLH1 16

ricegene editingCRISPR/Cas9off-target effectsOsbHLH1 1 6

《中国水稻科学》 2016 (6)

577-586,10

河南省现代农业技术体系专项经费资助项目(S2012-04-02)

10.16819/j.1001-7216.2016.6024

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