利用CRISPR/Cas9技术构建S100a9基因敲除小鼠OA

目的:利用CRISPR/Cas9技术构建S100a9基因敲除小鼠.方法:根据S100a9基因序列,设计一条针对鼠源S100a9基因的单链向导RNA.利用T7 RNA聚合酶体外转录sgRNA和Cas9 mRNA.将体外转录的sgRNA和Cas9 mRNA显微注射入C57BL/6小鼠受精卵,胚胎移植后,利用PCR和测序方法检测F0代小鼠S100a9基因敲除情况.结果:F0代出生20只小鼠,PCR鉴定其中有2只发生片段突变,突变效率为10％.结论:成功利用CRISPR/Cas9技术获得S100a9基因敲除小鼠.