氨基酸定点突变提高灵芝蛋白LZ-8热稳定性的研究OA北大核心CSCDCSTPCD
Improvement of Thermal Stability of Ganoderma lucidum Protein LZ-8 by Site-directed Mutation of Amino Acids
通过氨基酸定点突变技术提高灵芝免疫调节蛋白LZ-8的热稳定性.通过分子动力学模拟结合温度因子预测对LZ-8氨基酸突变位点进行理性设计,在毕赤酵母X33菌株内构建并表达LZ-8突变体蛋白,采用HeLa细胞生长抑制实验和差示量热扫描分析检测并比较了LZ-8突变前后生物学活性及热力学参数.结果显示,LZ-8 N-端 α 螺旋为理论预测的温度敏感区域,在该区域进行F8W和R9K氨基酸双位点突变,突变后的LZ-8热稳定性提高,相变温度Tm上升0.92℃,相转变焓值 ΔH提高23.14 kJ/mol,但突变后LZ-8生物学活性基本不变,LZ-8和LZ-8突变体对HeLa细胞生长抑制的IC50值分别是2.238μg/mL和2.407μg/mL.通过理性设计氨基酸突变位点,获得了稳定性提高但生物学活性不变的灵芝免疫调节蛋白LZ-8的突变体.
孙熙麟;蒋振彦;刘志屹;戴璐;孙非;黄伟
吉林大学药学院,长春 130021吉林大学药学院,长春 130021吉林大学再生医学科学研究所,长春 130021吉林大学再生医学科学研究所,长春 130021吉林大学再生医学科学研究所,长春 130021吉林大学再生医学科学研究所,长春 130021
LZ-8热稳定性分子动力学模拟温度因子定点突变
《生物技术通报》 2020 (1)
23-28,6
吉林省科技成果转化计划(201603064YY),吉林省科技攻关计划(20150204048YY),吉林省科技创新人才培育计划(20160520042JH)
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