橡胶树白粉菌(HO-73)启动子WY172不同长度片段的克隆及表达活性分析OA北大核心CSCDCSTPCD
Cloning and Expression Analysis of Different-length Fragments of Oidium heveae(HO-73)Promoter WY172
旨在克隆橡胶树白粉菌启动子WY172及其上游2K序列上4个不同长度缺失片段,以分析启动子各片段的表达活性.基于实验室前期研究基础,以WY172上游2K序列作为研究对象进行渐变缺失突变,得到4个不同长度的可能具有启动子活性的片段,结合WY172,选用pBI121载体作为骨架,分别替换GUS基因前的CaMV35S启动子,并分别构建重组表达载体,通过ATMT法转化农杆菌;利用GUS染色法和酶活性检测,分析WY172启动子及不同长度片段的酶活性.分别构建了pBI121-WY172、pBI121-WY172Q、pBI121-WY172Q1、pBI121-WY172Q2、pBI121-WY172Q3共5个重组的植物表达载体,所有植物表达载体烟草瞬时表达GUS染色均有蓝色出现,且蓝色程度均强于阳性对照CaMV35S启动子,其中pBI121-WY172Q3的GUS染色相对最深;GUS酶活性测定结果显示所有缺失突变片段都具有调控基因表达的启动子活性,且启动活性均强于CaMV35S启动子,WY172Q3调控GUS基因表达的活性最高.因此我们判断WY172及其上游2K序列上4个不同长度缺失片段均具有启动子活性,其中以WY172Q3启动子片段的表达活性最强.
殷金瑶;王义;徐良向;朱利;王晨;刘文波;缪卫国
海南大学植物保护学院 热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室,海口 570228海南大学植物保护学院 热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室,海口 570228海南大学植物保护学院 热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室,海口 570228海南大学植物保护学院 热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室,海口 570228海南大学植物保护学院 热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室,海口 570228海南大学植物保护学院 热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室,海口 570228海南大学植物保护学院 热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室,海口 570228
橡胶树白粉菌内源启动子WY172GUS染色缺失突变GUS酶活性
《生物技术通报》 2020 (1)
橡胶树白粉病菌Y/F/WxC效应蛋白功能分析
29-36,8
国家自然科学基金项目(31660033,315604958,31760499),海南省自然科学基金创新研究团队项目(2016CXTD002),973 前期专项(2011CB111612),现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-34-BC1),海南省重点研发计划项目(ZDYF2016208),海南大学科研启动基金项目(kyqd1535)
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