猪细小病毒病毒样颗粒的制备及其免疫评价OA北大核心CSTPCD
Preparation of Porcine Parvovirus Virus-like Particles and Its Immunization Evaluation
为了研制猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)疫苗,结合大肠杆菌密码子偏好性,经密码子优化,合成猪细小病毒VP2蛋白编码区序列,并将其插入原核表达载体pET28a中,随后转化BL21(DE3)感受态细胞,再转入伴侣蛋白质粒pTf16构建共表达载体,优化诱导表达条件,进行SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果表明,在L-阿拉伯糖质量浓度为2 mg/mL、IPTG浓度为0.1 mmol/L、温度为30℃、诱导12 h时重组蛋白VP2可溶性表达量最高,经硫酸铵沉淀和Ni-NTA亲和层析纯化获得纯度约90％的VP2蛋白,体外装配可形成直径约20 nm的具有血凝活性的VLPs.用制备的VLPs免疫昆明鼠并对其进行免疫评价,结果表明,制备的VLPs能有效刺激机体产生高滴度抗体,ELISA效价高达1:25600.可见,制备的VLPs能刺激机体产生特异性抗体.
陈玉梅;周景明;刘东民;马丽萍;冯景;刘运超
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农业科技
猪细小病毒VP2蛋白病毒样颗粒疫苗免疫评价
《河南农业科学》 2020 (4)
131-137,7
河南省科技攻关计划项目(172102110133)郑州市智汇郑州·1125聚才计划项目
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