非洲猪瘟病毒K196R和A240L蛋白的可溶性表达及酶活力分析OA北大核心CSCDCSTPCD
Soluble Expression and Enzyme Activity Analysis of African Swine Fever Virus K196R and A240L Proteins
旨在提供可用候选抗原蛋白,用于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的诊断及免疫预防研究.将ASFV SY18株K196R和A240L蛋白的编码基因进行密码子优化,并在其N端添加促溶标签进行融合表达;TEV酶切后利用亲和层析纯化目的蛋白,并通过Western blot和酶活检测试剂盒对其反应性和体外酶活力进行鉴定.结果 显示,K196R和A240L蛋白分别通过添加SUMO和MBP标签实现了可溶性表达,标签去除后蛋白大小分别为22 kD和27 kD左右;Western blot结果显示,K196R和A240L蛋白均能够与ASF阳性血清发生较好的特异性反应;酶活检测结果表明,二者均具有一定的体外酶催化活性.利用大肠杆菌表达的ASFVK196R和A240L可溶性蛋白,具有较好的反应性和一定的体外酶催化活性,可为ASFV的诊断及蛋白的相关功能研究提供一定的依据.
李鹏昊;梁严予;王彦伟;关洋;逄文强;田克恭
国家兽用药品工程技术研究中心,洛阳471003国家兽用药品工程技术研究中心,洛阳471003国家兽用药品工程技术研究中心,洛阳471003国家兽用药品工程技术研究中心,洛阳471003国家兽用药品工程技术研究中心,洛阳471003国家兽用药品工程技术研究中心,洛阳471003
非洲猪瘟K196R蛋白A240L蛋白可溶性表达Western blot鉴定酶活力分析
《生物技术通报》 2020 (11)
70-75,6
洛阳市重大科技专项:非洲猪瘟综合防控关键技术研究
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