金雀异黄素联合顺铂对SK-OV-3人卵巢腺癌细胞生物学行为影响的研究OA北大核心CSTPCD

目的 观察金雀异黄素联合顺铂对SK-OV-3人卵巢腺癌细胞生物学行为的影响,探讨其可能的作用机制.方法 培养SK-OV-3人卵巢腺癌细胞,分别给予金雀异黄素(20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L、200μmol/L)、顺铂(1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16μg/ml)单独作用24 h、48 h和72 h,采用偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,筛选合适的作用浓度和作用时间;SK-OV-3人卵巢腺癌细胞分为空白组(含正常生长的SK-OV-3细胞并加入等量培养液)、金雀异黄素组、顺铂组和联合用药组.药物作用48 h后,细胞划痕实验检测各组SK-OV-3细胞迁移能力;Hoechst33342荧光染色法检测各组SK-OV-3细胞核的形态;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;Western blotting检测各组SK-OV-3细胞PI3K、Akt、p-Akt、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白相对表达量.结果 MTT法检测结果显示,随着金雀异黄素、顺铂浓度的增加,作用时间的延长,细胞增殖抑制率上升(P<0.05).由此选定金雀异黄素160μmol/L、顺铂4μg/ml进行后续实验.细胞划痕实验、Hoechst33342染色法、流式细胞术结果均证明,与空白组比较,金雀异黄素组、顺铂组及联合用药组均可降低SK-OV-3细胞迁移能力,促进细胞凋亡(P<0.05),且联合用药组效果好于金雀异黄素组和顺铂组(P<0.05);Western blotting检测结果表明,与空白组比较,金雀异黄素组、顺铂组及联合用药组SK-OV-3细胞p-Akt、PI3K及Bcl-2蛋白相对表达量、p-Akt/Akt比值均降低(P<0.05),Bax、Caspase-3蛋白相对表达量升高(P<0.05);联合用药组p-Akt、PI3K及Bcl-2蛋白相对表达量、p-Akt/Akt比值较金雀异黄素组、顺铂组均降低,Bax、Caspase-3蛋白相对表达量均升高(P<0.05).结论 金雀异黄素对SK-OV-3人卵巢腺癌细胞增殖在一定范围内具有抑制作用;金雀异黄素可协同顺铂促进SK-OV-3人卵巢腺癌细胞的凋亡作用.