miR-503-5p靶向VEGFA基因通过PI3K/AKT信号通路调控人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和侵袭OA北大核心CSCDCSTPCD
miR-503-5p targets VEGFA gene to regulate proliferation, migration and invasion of human choriocarcinoma cells through PI3K/AKT signaling pathway
目的:探讨微小RNA-503-5p(miR-503-5p)对人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制.方法:培养滋养层细胞HTR8/Svneo和人绒毛膜癌细胞系JEG-3、BeWo和JAR,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-503-5p和血管内皮生长因子A(VEGFA)mRNA表达水平,Western blot法检测VEGFA蛋白表达水平.以JEG-3细胞为研究对象,构建过表达miR-503-5p或敲低VEGFA的JEG-3细胞,MTT检测细胞增殖,Transwell检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot检测细胞周期蛋白D1 (CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、磷酸化的磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)蛋白水平.生物信息学软件预测VEGFA的3'非翻译区(3'UTR)中含有与miR-503-5p互补的核苷酸序列,双荧光素酶报告基因实验验证miR-503-5p与VEGFA调控关系.结果:与HTR8/Svneo细胞比较,人绒毛膜癌细胞系JEG-3、BeWo和JAR中miR-503-5p水平均降低(P<0.05),VEGFA mRNA和蛋白水平均升高(P<0.05).过表达miR-503-5p或敲低VEGFA可降低JEG-3细胞OD值、迁移数和侵袭数及细胞中CyclinD1、MMP2、MMP9、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平(P<0.05).miR-503-5p靶向负调控VEGFA表达.VEGFA过表达逆转了miR-503-5p对JEG-3增殖、迁移和侵袭及PI3K/AKT信号通路的影响.结论:过表达miR-503-5p通过靶向负调控VEGFA表达和抑制PI3K/AKT信号通路抑制人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和侵袭.
谢迎春;邓丹;张玉梅;王琴
贵州中医药大学第一附属医院妇科检查室,贵阳550001贵州中医药大学第一附属医院产科,贵阳550001贵州省职工医院产科,贵阳550025贵州中医药大学第一附属医院妇科检查室,贵阳550001
医药卫生
绒毛膜癌miR-503-5p血管内皮生长因子API3K/AKT信号通路细胞增殖迁移和侵袭
《中国免疫学杂志》 2021 (6)
655-660,6
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