miR-31对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡及炎症因子表达的影响OA北大核心CSCDCSTPCD

目的:探讨miR-31靶向IL-34对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖、凋亡及炎症因子分泌的影响和分子机制.方法:采用10 ng/L的IL-1β处理软骨细胞构建OA细胞模型.荧光定量PCR(RT-qPCR)检测软骨细胞中miR-31和IL-34 mRNA的表达;MTT实验检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测P21和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达;E LISA法检测TNF-α和IL-6的表达.将miR-31模拟物转染软骨细胞,IL-1β处理后,采用上述方法检测细胞的存活、凋亡以及炎症因子表达情况.双荧光素酶报告基因实验验证miR-31对IL-34的靶向调控作用.将miR-31模拟物和IL-34过表达载体共转染软骨细胞,IL-1β处理后,采用上述方法检测细胞的存活、凋亡以及炎症因子表达情况.结果:IL-1β处理后,软骨细胞中miR-31的表达显著降低,IL-34 mRNA的表达显著升高,细胞存活率显著降低,凋亡率显著升高,P21和Caspase-3蛋白的表达显著升高,TNF-α和IL-6的表达显著升高(P＜0.05);过表达miR-31后,IL-1β处理的软骨细胞存活率显著升高,凋亡率显著降低,P21和Caspase-3蛋白的表达显著降低,TNF-α和IL-6的表达显著降低(P＜0.05).miR-31靶向IL-34并负调控其表达.与过表达miR-31比较,同时过表达miR-31和IL-34后IL-1β处理的软骨细胞存活率显著降低,凋亡率显著升高,P21和Caspase-3蛋白的表达显著升高,TNF-α和IL-6的表达显著升高(P＜0.05).结论:miR-31通过靶向IL-34可促进OA软骨细胞增殖,抑制细胞凋亡和炎症因子分泌.