铜绿假单胞菌群体感应代谢产物通过细胞表面脂质结构域溶解诱导宿主淋巴细胞死亡的机制OA北大核心CSCD

目的:探讨铜绿假单胞菌群体感应代谢产物通过细胞表面脂质结构域溶解诱导宿主淋巴细胞死亡的机制.方法:SPF级C57BL/6野生型小鼠于8～10周龄时给予铜绿假单胞菌感染,并进行3oc治疗.AnnexinV/PI凋亡检测法检测T细胞凋亡情况,免疫共沉淀和Western blot检测凋亡相关蛋白活性,RT-qPCR检测IL-1 mRNA、IL-6 mRNA表达.H9细胞与500μm 3oc HSL或3-oxo-C8HSL或3-oxo-C10 HSL孵育5/10 min,检测铜绿假单胞菌通过3oc诱导溶解诱导宿主淋巴细胞情况.结果:3oc浓度增加,T细胞活细胞数减少(P<0.05).与对照组相比,3oc处理的CD4 T细胞中caspase-3和caspase-9蛋白活性降低,Cld caspase-3和Cld caspase-9蛋白活性增强(P<0.05),3oc浓度与caspase-3和caspase-9表达呈负相关,与Cld caspase-3和Cld caspase-9表达呈正相关.3oc浓度增加,caspase-3和caspase-3蛋白活性降低,Cld caspase-3和Cld caspase-9蛋白活性增加(P<0.05).与对照组相比,3oc处理的IL-1和IL-6 mRNA表达增加,随着3oc浓度增加,IL-1和IL-6 mRNA表达增加(P<0.05).lasI缺陷和lasR缺陷均导致细胞数减少(P<0.05).突变体感染小鼠的肺部提取物显示,铜绿假单胞菌菌落形成单位减少(P<0.05).结论:3oc通过直接引发宿主自身TNFR1信号解除免疫反应治疗铜绿假单胞菌感染.