鼠尾静脉注射装载脑抗原的纳米粒子治疗手术脑损伤的实验研究OA北大核心CSCD

目的:研究装载髓鞘碱性蛋白(MBP)的纳米粒子的物理、化学特性,探讨鼠尾静脉注射装载MBP的纳米粒子诱导免疫耐受治疗手术脑损伤(SBI)继发性炎症的疗效.方法:①采用乳化溶剂挥发法合成含有支链普鲁兰多糖的聚乙烯醇(PVA)修饰聚-(β氨基酯)(PBAE)/聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)芯的纳米粒子;②30只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、对照组及实验组,每组10只.假手术组只开骨窗,保持硬脑膜的完整;对照组和实验组建立SBI模型,对照组经鼠尾静脉注射装载生理盐水(NS)的纳米粒子,实验组经鼠尾静脉注射装载同种异体MBP的纳米粒子.分别于SBI后1、7、14、21 d通过ELISA检测外周血血清中IL-2、IL-4水平,流式细胞术检测外周血CD4+/CD8+T细胞比值,进行改良神经功能缺陷评分(MNSS).SBI后第21天以脑组织切片免疫组织化学染色法检测神经小胶质细胞的表面标记物离子钙接头分子(Iba-1)表达水平.结果:①成功制备装载MBP或NS的纳米粒子,平均直径分别为266.4 nm和287.5 nm,平均Zeta电位值分别为14.2 mV和9.7 mV,电子显微镜观察具有典型的"核-壳结构";②术后第7、14、21天,实验组MNSS低于对照组,对照组高于假手术组(P<0.05).术后第7、14天,假手术组和实验组IL-2浓度低于对照组(P<0.05),假手术组和对照组IL-4浓度低于实验组(P<0.05).术后第7、14、21天,假手术组和实验组CD4+/CD8+T细胞低于对照组(P<0.05).术后21 d大鼠脑组织切片Iba-1表达阳性的细胞显微镜下呈棕黄色,实验组Iba-1表达量较对照组明显降低.结论:①本实验设计的新型纳米粒子对MBP具有高效和稳定的装载性;②鼠尾静脉注射装载MBP的纳米粒子能诱导机体产生免疫耐受,降低SBI术后继发性炎症反应及脑神经功能缺陷,可激活小胶质细胞从而保护脑神经细胞.