缺氧缺血性脑损伤大鼠miR-200b对Rac-1的调控作用研究OACSTPCD

目的 分析缺氧缺血性脑损伤动物模型miR-200b及Rac-1 mRNA表达,以及转染miR-200b后Rac-1 mRNA表达变化,并探讨miR-200b对Rac-1 mRNA可能存在的调控关系.方法 采用氧糖剥夺策略建立缺氧缺血性脑损伤新生大鼠模型,取全脑片分为4组:空白对照组、缺氧缺糖组、miR-200b转染组、阴性对照转染组,空白对照组正常培养,余3组予缺氧缺糖培养60 min,后缺氧缺糖组置于CO2培养箱中继续培养,miR-200b转染组、阴性对照转染组进行相关转染.12 h、24 h、3 d、5 d和7 d采用实时定量聚合酶链式反应进行miR-200b及Rac-1 mRNA检测.结果 成功建立了以纳米聚合物EntransterTM为载体转染miR-200b的方法.空白对照组12 h～3 d miR-200b mRNA表达呈上升趋势,3～7 d呈下降趋势.相反,缺氧缺糖组12 h～3 d miR-200b mRNA表达呈下降趋势,3～7 d呈上升趋势.miR-200b转染组miR-200b mRNA表达明显高于缺氧缺糖组及空白对照组(P<0.05).空白对照组12 h～3 d Rac-1 mRNA表达呈下降趋势,3～7 d呈上升趋势;缺氧缺糖组12 h～5 d Rac-1 mRNA表达呈上升趋势,5～7 d呈下降趋势.24 h～7 d经缺氧缺糖处理各组Rac-1 mRNA表达一直高于空白对照组.miR-200b在mRNA水平上不影响Rac-1 mRNA表达.结论 缺氧缺糖条件会导致脑组织中miR-200b mRNA表达下调及Rac-1 mRNA表达上调;miR-200b对Rac-1的调控关系尚未明确,仍需进一步实验验证.