三七丹参片通过免疫调节发挥对病毒性心肌炎小鼠的治疗作用OA北大核心

目的:研究三七丹参片经免疫调节发挥对病毒性心肌炎(VMC)小鼠的治疗作用.方法:90只小鼠随机分为正常对照组、模型组、三七丹参片低(0.43 g/kg)、中(0.86 g/kg)、高(1.72 g/kg)剂量组、阳性对照组(利巴韦林,1 mg/kg),每组15只.除正常对照组外,其余各组均经腹腔注射柯萨奇B3病毒(CVB3)构建病毒性心肌炎模型,并于建模成功后给予相应剂量药物,连续给药10 d,1次/d.末次给药结束12 h后,超声心动图检测心脏射血分数(EF)、心率(HR);HE染色观察小鼠心肌损伤情况;ELISA检测心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶、肌钙蛋白、肌红蛋白水平;流式细胞术检测脾脏CD4+T/CD8+T、辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)淋巴细胞比例;免疫荧光检测巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在心肌组织中的表达水平;免疫组化法检测Th17转录因子维甲酸相关孤核受体γt(RoRγt)、Treg转录因子叉头框蛋白P3(Foxp3)蛋白在心肌组织中阳性表达水平;TUNEL法检测小鼠心肌细胞凋亡率;Western blot检测心肌组织中IL-17、IL-10、先天免疫力蛋白泛素蛋白酶2(Senp2)、免疫炎症反应相关通路蛋白Toll样受体-4(TLR4)、果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(Notch1)表达水平.结果:与正常对照组相比,模型组小鼠死亡率增高、心肌细胞坏死及炎症浸润等病理损伤加重,肌酸激酶同工酶、肌钙蛋白、肌红蛋白等心肌损伤标志物表达、心肌细胞凋亡率、心肌组织MIF表达、RoRγt阳性表达、Th17/Treg、CD4+T/CD8+T、IL-17、IL-10、TLR4、Notch1蛋白表达升高(P<0.05),EF、HR、Foxp3阳性表达、Senp2蛋白表达降低(P<0.05).与模型组相比,三七丹参片各剂量组及阳性对照组小鼠死亡减少,炎症及免疫功能相关蛋白表达与模型组相反,心功能提高,心肌损伤相关指标表达降低、Th17/Treg及CD4+T/CD8+T趋于平衡,且上述指标变化差异均有统计学意义(P<0.05),三七丹参片剂量越高上述指标变化越明显(P<0.05);阳性对照组与三七丹参片中剂量组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论:三七丹参片可能通过调节免疫功能,降低炎症反应,来改善VMC小鼠心肌损伤及凋亡,且其降低免疫炎症反应作用可能与抑制Notch1、TLR4通路激活有关.