畜禽养殖粪污中典型致病菌的三重微滴式数字PCR定量检测方法的建立OA北大核心CSCDCSTPCD
为精准、快速检测畜禽养殖粪污中典型致病微生物,减少人畜共患病的传播风险,以金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌(O157:H7)和肠炎沙门氏菌3种常见致病菌为研究对象,通过筛选其特异性引物与探针、优化反应系统,建立起快速、稳定的多重微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)反应体系。通过检测不同菌株验证该体系的特异性,并确定畜禽养殖废弃物致病菌的检出限,开发出多重微滴数字PCR快速检测方法。研究结果表明,各对引物探针对目标菌株均能扩增,ddPCR体系内未出现交叉反应,检测肠炎沙门氏菌的绝对定量检测低限为0.68 copies/μL;检测金黄色葡萄球菌的绝对定量检测低限为0.79 copies/μL;检测大肠埃希氏菌的绝对定量检测低限为1.02 copies/μL。研究建立的方法可实现对畜禽养殖粪污中3种典型致病菌的高效率、高精度的检测。
程深伟;张克强;梁军锋;刘福元;郜兴亮;杜连柱
农业农村部环境保护科研监测所,天津300191农业农村部环境保护科研监测所,天津300191农业农村部环境保护科研监测所,天津300191新疆农垦科学院畜牧兽医研究所,新疆石河子832000新疆农垦科学院畜牧兽医研究所,新疆石河子832000农业农村部环境保护科研监测所,天津300191
畜牧业
养殖粪污沙门氏菌大肠埃希氏菌金黄色葡萄球菌三重微滴式数字PCR
《生物技术通报》 2022 (9)
P.271-280,10
国家重点研发计划(2016YFD0501407)。
评论