烟草NtCBT基因启动子酵母单杂诱饵载体构建及互作蛋白筛选OA北大核心
Construction of Yeast One-hybrid Bait Vector of Tobacco NtCBT Gene Promoter and Screening of Interacted Proteins
为了筛选烟草类西柏烷生物合成途径中西柏三烯一醇合酶基因(NtCBT)的上游调控转录因子,将NtCBT基因启动子截为6段(P1-P6区域),分别构建酵母单杂诱饵载体pAbAi-Px,将pAbAi-Px转化Y1H酵母感受态细胞构建诱饵菌株并进行自激活检测,从烟草腺毛酵母cDNA文库中筛选与P5区域(-279--119 bp)互作的转录因子.结果表明,P1-P5区域所构建的诱饵菌株,在AbA浓度为200 ng/mL时转录自激活得到有效抑制;在以P5区域为诱饵菌株的筛库实验中,共获得49个阳性克隆,去除冗余序列后35个克隆为非重复序列,其中3个克隆注释为ANL2、ML1及NF-Y转录因子.以上结果为进一步研究NtCBT基因的表达调控机制奠定了基础.
余婧;杨慧;余世洲;赵会纳;郑庆霞;王兵;雷波
贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室,贵阳 550081贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室,贵阳 550081贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室,贵阳 550081贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室,贵阳 550081中国烟草总公司郑州烟草研究院,郑州 450001贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室,贵阳 550081贵州省烟草科学研究院烟草行业烟草分子遗传重点实验室,贵阳 550081
酵母单杂交转录因子栽培烟草启动子NtCBT基因类西柏烷
《生物技术通报》 2022 (10)
73-79,7
中国烟草总公司贵州省公司科技项目(2021XM02),中国烟草总公司科技项目[110202101005(JY-05),110202001021(JY-04)]
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