miR-935在Notch1介导的儿童T-ALL中的作用机制研究OA北大核心CSTPCD

目的:探讨miR-935在Notch1介导儿童T淋巴细胞白血病(T-ALL)中的作用机制.方法:通过荧光素酶报告实验验证Notch1是miR-935的靶基因.培养T-ALL细胞并进行分组处理,分别为对照组、miR-935过表达组、miR-935沉默组、Notch1过表达组及Notch1沉默组.检测各组细胞增殖、周期以及凋亡情况.RT-PCR实验检测miR-935在各组细胞中的表达,Western blot检测各组Notch1蛋白表达情况.结果:通过miRWalk预测和报告基因实验可知,Notch1为miR-935的靶基因.对照组、miR-935过表达组、miR-935沉默组、Notch1过表达组、Notch1沉默组的细胞抑制率分别为100.00％、(45.92±5.13)％、(104.03±2.11)％、(105.29±1.53)％、(44.63±3.27)％;细胞凋亡率分别为(8.12±1.43)％、(35.13±5.67)％、(4.08±1.25)％、(3.77±0.98)％、(36.08±6.32)％;与对照组相比,miR-935过表达和Notch1沉默组G0/G1期细胞明显增加,另外两组G0/G1期明显减少(P＜0.05).RT-PCR和Western blot实验表明,与对照组相比,miR-935过表达组miR-935表达上升,Notch 1含量显著减少;miR-935沉默组miR-935表达减少,Notch1含量显著提升;Notch1过表达和沉默组miR-935表达无明显变化,但过表达组Notch1蛋白水平显著上升,沉默组Notch1蛋白水平显著下降.结论:miR-935过表达可有效抑制T-ALL细胞增殖,阻滞细胞周期并促进T-ALL细胞凋亡,具有较好的抗肿瘤效果,其作用机制可能是通过调控Notch1并最终介导T-ALL细胞活动.