hsa_circ_0044235对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和迁移的影响及机制OA北大核心CSTPCD

目的:探讨hsa_circ_0044235对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和迁移的影响及可能机制.方法:体外培养滑膜成纤维细胞MH7A,分为对照组(Con组)、LPS组、LPS+pcDNA组、LPS+pcDNA-hsa_circ_0044235组、LPS+pcDNA-hsa_circ_0044235+miR-NC组和LPS+pcDNA-hsa_circ_0044235+miR-338-5p组,RT-qPCR检测各组细胞hsa_circ_0044235和miR-338-5p表达,克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,划痕实验检测细胞迁移,Western blot检测细胞E-cadherin和N-cadherin蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验验证hsa_circ_0044235与miR-338-5p的调控关系.结果:与Con组比较,LPS组MH7A细胞hsa_circ_0044235表达和E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05),而miR-338-5p表达、细胞克隆形成数、划痕愈合率及N-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),细胞周期G0～G1期缩短(P<0.05),S期延长(P<0.05).与LPS+pcDNA组比较,LPS+pcDNA-hsa_circ_0044235组MH7A细胞克隆形成数、划痕愈合率及N-cadherin蛋白表达降低(P<0.05),细胞周期G0～G1期延长(P<0.05),S期缩短(P<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05).与LPS+pcDNA-hsa_circ_0044235+miR-NC组比较,LPS+pcDNA-hsa_circ_0044235+miR-338-5p组MH7A细胞克隆形成数、划痕愈合率及N-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),细胞周期G0～G1期缩短(P<0.05),S期延长(P<0.05),E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验结果显示,hsa_circ_0044235可靶向结合miR-338-5p.结论:过表达hsa_circ_0044235可能靶向抑制miR-338-5p表达降低LPS诱导的滑膜成纤维细胞增殖和迁移,hsa_circ_0044235/miR-338-5p轴可能为类风湿关节炎治疗提供了新靶点.