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猪德尔塔冠状病毒荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用OA北大核心CSTPCD

Establishment and preliminary application of fluorescence quantitative PCR for detection of porcine deltacoronavirus

中文摘要

针对猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)的N基因建立检测PDCoV的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法,并验证了其特异性、敏感性和重复性等.结果显示,本方法特异性高,与猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪肠病毒、伪狂犬病病毒、猪嵴病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪星状病毒等病原无交叉反应.本方法Ct值与标准模板浓度在108.5~103.5PFU/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数(R2)为0.994 9,直线方程为y=-3.594 9x+41.006,最低检测限为102.50 PFU/mL.运用该方法检测PDCoV感染不同来源细胞系的病毒载量,发现的PDCoV感染宿主谱广,能感染不同来源的细胞,且在LLC-PK细胞上的复制能力最强.本研究建立的方法为PDCoV的防控提供了技术支持.

秦秋英;欧阳康;速雪丽;黄诗婷;秦毅斌;何颖;卢冰霞;陈樱;韦祖樟;黄伟坚

广西大学动物科学技术学院动物传染病与分子免疫学实验室,广西南宁 530005广西大学动物科学技术学院动物传染病与分子免疫学实验室,广西南宁 530005广西大学动物科学技术学院动物传染病与分子免疫学实验室,广西南宁 530005广西大学动物科学技术学院动物传染病与分子免疫学实验室,广西南宁 530005广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室,广西南宁 530005广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室,广西南宁 530005广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室,广西南宁 530005广西大学动物科学技术学院动物传染病与分子免疫学实验室,广西南宁 530005广西大学动物科学技术学院动物传染病与分子免疫学实验室,广西南宁 530005广西大学动物科学技术学院动物传染病与分子免疫学实验室,广西南宁 530005

农业科技

猪德尔塔冠状病毒N基因荧光定量PCRLLC-PK细胞

《中国兽医科学》 2022 (11)

1373-1378,6

广西自然科学基金资助项目(2021GXNSFAA196067)

10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0178

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