独占春×美花兰杂交F1代基于SSR标记的杂种鉴定和遗传多样性分析OACSTPCD

海南原生种独占春和美花兰属兰花稀缺濒危种,分别是我国野生植物二级和一级保护植物,为对其种质资源进行保护和开发利用,以独占春和美花兰作为亲本进行杂交,并获得杂交群体.为准确鉴定独占春×美花兰杂交种真实性,分析杂交F1 代与亲本间的遗传关系,采用SSR标记对独占春和美花兰杂交F1 代 23 个杂交后代进行杂种鉴定、遗传多样性分析和聚类分析.结果表明:通过PCR技术从 48 对引物中筛选出 8 对引物,运用SSR分子标记证实了 23 个杂交后代是真杂种,杂种真实率为 100%.其中,引物Cym45、Hub131 和Hub8 鉴定的 23 个杂交后代均兼具双亲特异位点,Hub125 鉴定的 23 个杂交后代仅具有父本特异位点,引物Cym9 鉴定出 1 个新的位点;引物Cym25、Hub125 和Cym47 呈低度多态性[多态性信息含量(PIC)<0.25],引物 Cym45、Hub131、Hub8 和 Cym9 呈中高度多态性(0.25<PIC<0.5),引物Cym172 的PIC为 0.59,具有高度多态性,可作为独占春×美花兰杂交后代指纹图谱构建的优选引物;UPGMA聚类分析结果表明,当遗传系数为 0.8111 时,可将受测材料分为 3 类,亲本各为一类,杂交后代为一类.杂交后代又可分为 3 个分支,X7 为一个分支,X6 和X21 聚类在一起,其余 20 个F1 代单株聚类为一簇.表明SSR标记应用于海南原生种兰花杂种鉴定和遗传多样性分析切实可行,可为海南兰花育种、选种提供有效的技术支撑和数据基础.同时,SSR标记的PIC是反映分子标记能力的一个重要指标,本研究开发的中高度多态性引物和高度多态性引物可为海南野生兰花基因图库的构建,海南野生兰种质资源库的建立和开发奠定基础.