基于Notch信号通路探讨柚皮素调节Th17/Treg平衡治疗哮喘的机制研究OACSTPCD

目的:基于Notch信号轴探究柚皮素对支气管哮喘(BA)小鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响,并初步探究其作用机制.方法:将C57BL/6小鼠建立BA模型,随机分为模型组、柚皮素组(75 mg/kg)、γ-分泌酶抑制剂(DAPT,Notch1配体抑制剂)组(5μmol/L)、Notch配体-Jagged1过表达(ad-Jagged1)组(20μl/只)、ad-Jagged1阴性对照(ad-NC)组,每组15只,另取15只正常小鼠作为对照组.检测小鼠肺功能、支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞数、IL-17、IL-22、IL-10、TGF-β水平及外周血Th17/Treg;HE染色观察肺组织变化;免疫组化检测Th17转录因子-RoRγt、Treg转录因子-Foxp3阳性表达;Western blot检测Jagged1、Notch1、RoRγt、Foxp3、TGF-β、毛状蛋白(Hes1)、核转录抑制因子(RBPJ)、IL-17蛋白表达.结果:与正常对照组相比,模型组小鼠肺功能减弱,肺组织炎症损伤加重,BALF中炎症细胞增加,Th17/Treg升高,Th17介导的促炎途径Notch1/RBPJ/IL-17/RoRγt相关蛋白表达升高,而Treg介导的抗炎途径Jagged1/TGF-β/Hes1/Foxp3相关蛋白表达降低(P<0.05).与模型组相比,柚皮素、DAPT、ad-Jagged1均可缓解BA小鼠肺功能减弱及炎症浸润,柚皮素不仅可抑制Th17介导的促炎途径Notch1/RBPJ/IL-17/RoRγt,还可上调Treg介导的抗炎途径Jagged1/TGF-β/Hes1/Foxp3活化,调节Th17/Treg平衡(P<0.05);DAPT仅能通过抑制Th17介导的促炎途径Notch1/RBPJ/IL-17/RoRγt调节Th17/Treg平衡(P<0.05);ad-Jagged1仅能通过上调Treg介导的抗炎途径Jagged1/TGF-β/Hes1/Foxp3活化调节Th17/Treg平衡(P<0.05).结论:柚皮素可通过调控Notch信号相关配体,即抑制Notch1、上调Jagged1,维持Th17/Treg介导的促炎及抗炎反应平衡,缓解BA病理损伤.