水稻幼苗酵母单杂文库构建及LAZY1上游调控因子筛选OACSCDCSTPCD
Construction of Yeast One-hybrid Library and Screening of Factors Regulating LAZY1 Expression in Rice
LAZY1 通过促进生长素的横向极性运输来调控水稻分蘖角,形成紧密直立的株型,从而提高水稻产量.为了研究LAZY1 表达的分子调控机制,本研究利用酵母单杂筛库技术筛选水稻LAZY1 的上游调控因子.首先以水稻粳稻品种日本晴基因组DNA为材料,经PCR扩增得到LAZY1 的启动子序列,接着连接到pHIS2 构建诱饵载体,并转化到AH109 酵母菌株得到pHIS2-LAZY1 诱饵菌.同时以萌发 3 d的日本晴幼苗为材料,采用SMART技术构建cDNA文库,再将纯化的cDNA文库和pGADT7-Rec共转化酵母菌株Y187 获得酵母单杂文库菌,接着将上述诱饵菌和文库菌进行接合完成酵母单杂筛库,共筛选得到 21 个候选的上游调控因子,进一步对其中的转录因子多蛋白桥梁因子OsMBF1 进行双荧光素酶实验验证,结果显示OsMBF1 可在体内促进LAZY1 的转录.本研究得到LAZY1 的上游正调控因子OsMBF1,为揭示LAZY1 介导的生长素极性运输和分蘖角决定的调控网络提供了理论基础,将有助于揭示水稻由散生变为直立生长的奥秘,具有重要的理论和实践意义.
黄小龙;孙贵连;马丹丹;闫慧清
贵州师范大学生命科学学院,贵阳 550025||贵州省植物生理与发育调控重点实验室,贵阳 550025||西南喀斯特山地生物多样性保护国家林业和草业局重点实验室,贵阳 550025贵州师范大学生命科学学院,贵阳 550025||贵州省植物生理与发育调控重点实验室,贵阳 550025||西南喀斯特山地生物多样性保护国家林业和草业局重点实验室,贵阳 550025贵州师范大学生命科学学院,贵阳 550025||贵州省植物生理与发育调控重点实验室,贵阳 550025||西南喀斯特山地生物多样性保护国家林业和草业局重点实验室,贵阳 550025贵州师范大学生命科学学院,贵阳 550025
水稻LAZY1酵母单杂筛库转录因子
Oryza sativaLAZY1yeast one-hybrid(Y1H)screeningtranscription factor
《生物技术通报》 2023 (9)
森林草莓喀斯特高钙适应性的分子机制
126-135,10
国家自然科学基金委员会贵州省人民政府喀斯特科学研究中心项目(U1812401),国家自然科学基金项目(32160699),贵州省自然科学基金重点项目(ZK[2022]ZD032)
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