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鸡圆圈病毒3型SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立与应用

牛群 庄丽云 雷天宇 戴婷婷 孟庆福 刘荣昌 何华 郑新添

中国兽医科学2024,Vol.54Issue(1):56-62,7.
中国兽医科学2024,Vol.54Issue(1):56-62,7.DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2024.0013

鸡圆圈病毒3型SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立与应用

Establishment and application of SYBR Green Ⅰ real-time fluorescence quantitative PCR method for chicken circle virus type 3

牛群 1庄丽云 2雷天宇 2戴婷婷 2孟庆福 3刘荣昌 4何华 5郑新添3

作者信息

  • 1. 龙岩学院预防兽医学与生物技术福建省高等学校重点实验室,福建龙岩 364000||河南农业大学动物医学院,河南郑州 450046
  • 2. 龙岩学院预防兽医学与生物技术福建省高等学校重点实验室,福建龙岩 364000||福建农林大学动物科学学院,福建福州 350000
  • 3. 龙岩学院预防兽医学与生物技术福建省高等学校重点实验室,福建龙岩 364000
  • 4. 福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建福州 350013||福建省禽病防治重点实验室,福建福州 350013
  • 5. 河南农业大学动物医学院,河南郑州 450046
  • 折叠

摘要

Abstract

In this study,a standard plasmid based on GyV3 VP2 gene was constructed and used as a template to establish a standard curve.On the basis of optimizing the qPCR reaction system,the specificity,sensitivity and repeatability of this method were evaluated.The results revealed the method was only specific for GyV3 amplification,the minimum detection template concentration was 1.585 × 101 copies/μL,and the coefficient of variation in both intra-class and intra-group repea-tability tests was less than 1.0%.The qPCR method established in this study was used to detect 50 clinical samples,and the detection rate was 10%(5/50),higher than the conventional PCR detection rate of 8%(4/50).The results above indicate that the real-time fluorescent quantitative PCR method established in this study has high specificity,reproducibility,and sensitivity and can be utilized for quick clinical detection of GyV3.

关键词

圆圈病毒3型/VP2基因/实时荧光定量PCR

Key words

gyrovirus 3/VP2 gene/real-time fluorescence quantitative PCR

分类

农业科技

引用本文复制引用

牛群,庄丽云,雷天宇,戴婷婷,孟庆福,刘荣昌,何华,郑新添..鸡圆圈病毒3型SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立与应用[J].中国兽医科学,2024,54(1):56-62,7.

基金项目

国家现代农业产业技术体系资助项目(CARS-42) (CARS-42)

龙岩学院预防兽医学与生物技术福建省高等学校重点实验室开放基金项目(2022KF03) (2022KF03)

河南农业大学"拔尖人才"项目(30500737) (30500737)

中国兽医科学

OA北大核心CSTPCD

1673-4696

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