骨形态发生蛋白9对肝细胞癌肿瘤干细胞干性、增殖和侵袭的影响及机制OACSTPCD

目的探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)对肝细胞癌(HCC)肿瘤干细胞(CSCs)干性、增殖和侵袭的影响及机制。方法取对数生长期的正常肝细胞、肝癌细胞、肝癌CSCs,采用RT-qPCR法检测BMP9 mRNA表达,采用Western blotting法检测BMP9蛋白表达。采用慢病毒干扰载体转染肝细胞癌肿瘤干细胞(HepG2-CSCs)以敲低BMP9表达,并分成HepG2-CSCs组、HepG2-CSCs-BMP9敲低组。加入MAPK/ERK信号激动剂(DIPQUO)后,将细胞分为三组:HepG2-CSCs组、HepG2-CSCs敲低组及HepG2-CSCs敲低+DIPQUO组。采用RT-qPCR实验检测HepG2-CSCs干性相关分子CD44、SOX2和OCT4表达,采用CCK-8实验检测细胞增殖能力,采用Transwell实验检测细胞侵袭能力,采用蛋白印迹法检测MAPK/ERK通路关键蛋白表达。结果与正常肝细胞比,肝癌细胞和肝癌肿瘤干细胞(HepG2-CSCs)中BMP9表达上调(P<0.05)。HepG2 CSCs细胞中BMP9 mRNA和蛋白表达高于HepG2细胞(P均<0.05)。BMP9敲低后,HepG2-CSCs-BMP9敲低组中HepG2-CSCs细胞中干细胞相关标志物CD44、SOX2、OCT4 mRNA表达较HepG2-CSCs组降低(P均<0.05)。与HepG2-CSCs组比较,HepG2-CSCs-BMP9敲低组中HepG2-CSCs在48、72和96 h的细胞增殖能力降低(P均<0.05),HepG2-CSCs细胞迁移和侵袭能力降低(P均<0.05)。较HepG2-CSCs组,HepG2-CSCs-BMP9敲低组中HepG2-CSCs中p-ERK1/2和p-MEK1/2蛋白表达显著降低(P均<0.05)。HepG2-CSCs敲低+DIPQUO组HepG2-CSCs中干细胞相关标志物CD44、SOX2、OCT4 mRNA表达增加(P均<0.05),HepG2-CSCs增殖和侵袭能力增强(P均<0.05)。结论BMP9敲低可抑制HepG2-CSCs干性维持并抑制细胞增殖、降低侵袭能力,机制可能与抑制MAPK/ERK信号通路有关。