毫针和火针疗法治疗骨髓抑制大鼠模型的分子作用机制OA

目的探讨毫针和火针治疗大鼠骨髓抑制模型的分子作用机制。方法研究时间2022年3月至9月。采用随机数字表法将购于北京维通利华实验动物技术有限公司的96只4~6周龄、体质量为250~300 g的SD大鼠分为对照组、模型组、火针组和毫针组,各24只。除对照组外,其余各组大鼠用环磷酰胺诱导建立大鼠骨髓抑制模型,造模成功后,对照组和模型组大鼠每天陪同抓取、固定,但是不进行治疗;火针组大鼠根据编号依次将大鼠俯卧固定于鼠板上,选取双侧足三里穴于造模后第1天、第3天、第5天、第7天,采用火针点刺法治疗,火针垂直刺入3 mm,不留针,隔日1次,连续7 d;毫针组大鼠根据编号依次将大鼠俯卧固定于鼠板上,针具、选穴同火针组,垂直刺入3 mm,留针6 min,于造模后第1天开始,每天1次,连续7 d。分别于干预1~7 d取大鼠尾静脉血10μl测定白细胞数量、红细胞数量、血红蛋白含量和血小板数量等血常规指标;制作骨髓组织切片,进行瑞氏吉姆沙染色;流式细胞术检测骨髓单核成纤维细胞周期;免疫印迹法检测骨髓单核成纤维细胞周期相关蛋白的表达。采用LSD-t检验、单因素方差分析和Kruskal-Wallis检验。结果模型组大鼠白细胞数量和血小板数量均低于对照组(均P<0.05),红细胞数量、血红蛋白含量高于对照组(均P<0.05)。治疗后3、5、7 d,火针组和毫针组白细胞数量[(3.53±0.19)×10^(9)/L、(3.42±0.22)×10^(9)/L比(3.12±0.10)×10^(9)/L;(3.78±0.23)×10^(9)/L、(3.65±0.29)×10^(9)/L比(2.88±0.24)×10^(9)/L;(4.08±0.43)×10^(9)/L、(3.70±0.17)×10^(9)/L比(2.27±0.12)×10^(9)/L]和血小板数量[(79.72±3.89)×10^(9)/L、(79.15±5.22)×10^(9)/L比(70.17±2.20)×10^(9)/L;(85.18±3.40)×10^(9)/L、(81.88±4.97)×10^(9)/L比(62.73±3.80)×10^(9)/L;(92.18±7.64)×10^(9)/L、(83.45±4.29)×10^(9)/L比(51.92±1.64)×10^(9)/L]高于模型组(均P<0.05),红细胞数量[(1.36±0.03)×10^(12)/L、(1.37±0.03)×10^(12)/L比(1.52±0.03)×10^(12)/L;(1.32±0.03)×10^(12)/L、(1.34±0.02)×10^(12)/L比(1.59±0.02)×10^(12)/L;(1.24±0.07)×10^(12)/L、(1.32±0.05)×10^(12)/L比(1.68±0.03)×10^(12)/L]和血红蛋白含量[(84.00±1.67)g/L、(84.33±1.86)g/L比(94.00±1.26)g/L;(82.00±2.68)g/L、(83.50±0.84)g/L比(97.83±1.17)g/L;(76.67±5.32)g/L、(81.83±3.43)g/L比(104.17±2.04)g/L]低于模型组(均P<0.05);毫针组和火针组中骨髓原始细胞数量高于模型组,且可见杆状核细胞的出现;火针组和毫针组G0/G1期骨髓单核成纤维细胞百分率始终低于模型组(均P<0.05),其中火针组变化较毫针组更显著,并且S期和G2/M期骨髓单核成纤维细胞百分率始终高于模型组(均P<0.05)。毫针组和火针组治疗后3、7 d大鼠骨髓单核成纤维细胞中CD4、CD6、Cylcin D1和E2F1蛋白相对表达量明显上调(均P<0.05)。火针组细胞周期相关蛋白CD4、CD6、Cylcin D1和E2F1的表达上调更显著。结论毫针和火针治疗均可以改善环磷酰胺诱导的大鼠骨髓抑制,其分子机制可能与上调大鼠骨髓单核成纤维细胞中细胞周期相关蛋白CD4、CD6、Cylcin D1和E2F1表达有关,从而恢复骨髓基质细胞增殖和休眠的代谢平衡。