CD147通过AIM2炎症小体介导宫颈癌细胞焦亡和增殖OACSTPCD

目的 探讨跨膜蛋白CD147表达量变化对AIM2炎症小体介导的宫颈癌细胞焦亡及增殖的影响。方法 采用Western blot实验检测CD147在宫颈癌细胞SiHa(HPV+)、C33a(HPV-)和正常宫颈上皮细胞H8(HPV+)、HCer Epic(HPV-)中的表达水平;通过慢病毒转染SiHa细胞下调CD147的表达,根据不同处理分为SiHa组、阴性对照组(shCD147-NON)、敲低组1(shCD147-1)和敲低组2(shCD147-2),通过Western blot、RT-qPCR和观察细胞绿色荧光表达验证转染效果;通过Western blot和RT-qPCR检测CD147和AIM2炎症小体相关因子AIM2、Caspase-1、IL-18、GSDMD蛋白和mRNA的表达;检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)释放度,荧光倒置显微镜下观察细胞的形态;CCK-8实验检测细胞的增殖能力;细胞克隆实验检测细胞集落形成能力。结果 Western blot结果显示,与HCerEpic细胞比较,SiHa细胞中CD147蛋白表达最高(P <0.05);CD147低表达慢病毒有效下调了SiHa细胞CD147表达水平(P <0.05);Western blot及RT-qPCR实验结果表明,与SiHa组相比,shCD147-1组和shCD147-2组AIM2、Caspase-1、IL-18、GSDMD蛋白和mRNA表达明显升高(P <0.05);乳酸脱氢酶(LDH)释放实验显示,与SiHa组相比,shCD147组LDH释放度明显升高(P <0.05);荧光倒置显微镜下显示,shCD147组出现肿胀和空泡化,表现出典型的细胞焦亡现象;与SiHa组相比,shCD147-1组和shCD147-2组细胞增殖能力和集落形成能力明显降低(P <0.05)。结论 CD147低表达有效上调宫颈癌SiHa细胞AIM2炎症相关因子的表达,诱发细胞焦亡,抑制细胞的增殖和克隆。