基于麝香酮对大鼠心肌细胞凋亡的影响探讨辛温通络法治疗糖尿病心肌病的作用机制OACSTPCD

目的观察麝香酮调控脂肪酸合成酶(Fas)/脂肪酸合成酶配体(FasL)信号通路对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌细胞凋亡的影响,探讨陈树泉“辛温通络”理论治疗DCM的作用机制。方法将SD大鼠分为空白组、DCM组、麝香酮低剂量组(0.68 mg/kg麝香酮)、麝香酮高剂量组(2.72 mg/kg麝香酮)、二甲双胍组(140 mg/kg二甲双胍)、麝香酮高剂量+重组人FasL蛋白(rh-FasL)组(2.72 mg/kg麝香酮+0.017 mg/kg rh-FasL),每组12只。除空白组外,其他组均采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素方式构建DCM大鼠模型,建模成功后,给药1次/d,持续6周。末次处理结束后,检测各组大鼠空腹血糖、左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS);采用苏木素-伊红(HE)染色法、Masson染色法分别检测心肌组织病理损伤及纤维化程度;采用分光光度法检测心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;采用TUNEL染色法观察心肌细胞凋亡情况;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测心肌组织中裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Fas、FasL蛋白表达。结果与空白组比较,DCM组大鼠心肌组织病理损伤严重,空腹血糖、MDA含量、心肌胶原面积分数、心肌细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、Bax、Fas、FasL蛋白表达升高,LVEF、LVFS、SOD活性降低,差异有统计学意义(P<0.05);与DCM组比较,麝香酮低剂量组、麝香酮高剂量组、二甲双胍组大鼠心肌组织病理损伤减轻,空腹血糖、MDA含量、心肌胶原面积分数、心肌细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、Bax、Fas、FasL蛋白表达降低,LVEF、LVFS、SOD活性升高,差异有统计学意义(P<0.05);与麝香酮低剂量组比较,麝香酮高剂量组、二甲双胍组大鼠心肌组织病理损伤减轻,空腹血糖、MDA含量、心肌胶原面积分数、心肌细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、Bax、Fas、FasL蛋白表达降低,LVEF、LVFS、SOD活性升高,差异有统计学意义(P<0.05);与麝香酮高剂量组比较,麝香酮高剂量+rh-FasL组大鼠心肌组织病理损伤加剧,空腹血糖、MDA含量、心肌胶原面积分数、心肌细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、Bax、Fas、FasL蛋白表达升高,LVEF、LVFS、SOD活性降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论麝香酮可能通过抑制Fas/FasL通路抑制DCM大鼠氧化应激及心肌细胞凋亡。