土霉素原料及片剂中有关物质测定OACSTPCD

目的建立测定土霉素原料及片剂中有关物质含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Thermo Hypersil GOLD Sino Chrom C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为醋酸铵溶液[0.25 mol/L醋酸铵-0.05 mol/L乙二胺四乙酸二钠溶液-三乙胺(100∶10∶1,V/V/V),用醋酸调pH至7.5]-乙腈(88∶12,V/V),流动相B为乙腈进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果土霉素的质量浓度在0.5~20μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9998,n=6);检测限为1.4 ng,定量限为5.0 ng;精密度和稳定性试验结果的RSD均小于2.0%;专属性试验与强力破坏试验中,土霉素与强制破坏的降解产物及与其他8种已知杂质对照品均可实现有效分离。土霉素片中2-乙酰-2-去酰胺土霉素检出量为1.62%~2.73%,其他杂质总含量为1.20%~1.84%。结论该方法操作简便、专属性好、灵敏度高,可用于土霉素原料及片剂中有关物质的测定。拟订土霉素片中有关物质2-乙酰-2-去酰胺土霉素的限度为不得过对照溶液主峰面积的3.5%,其他各杂质峰面积之和不得过对照溶液主峰面积的2.0%。