基于NF-κB信号通路探究miR-3197在糖尿病视网膜病变中的作用机制OA北大核心CSTPCD

目的基于核因子-κB(NF-κB)信号通路探究miR-3197在糖尿病视网膜病变(DR)中的机制。方法选取衡水市人民医院2021年1月至2021年12月收治的47例DR患者为DR组,并收集同期及同年龄段47例健康人作为对照组,收集其性别、年龄、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、miR-3197数据进行比较。分析DR患者miR-3197与实验室数据的相关性,并绘制miR-3197对DR诊断的受试者工作特征曲线(ROC曲线)。体外培养人视网膜微血管内皮细胞(hRMEC),分别采用5.5 mmol·L^(-1)与30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖处理细胞,将其记为低糖(NG)组与高糖(HG)组;将anti-miR-NC与anti-miR-3197转染细胞后,加30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖处理,记为HG+anti-miR-NC组与HG+anti-miR-3197组。实时荧光定量PCR检测miR-3197相对表达量,流式细胞术检测hRMEC凋亡率,酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子(TNF-α)与白细胞介素-6(IL-6)的表达,Western blot检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase3)蛋白、Bax蛋白及NF-κB信号通路相关蛋白[磷酸化NF-κB p65(p-p65)、p65、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)及NF-κB抑制蛋白(IκBα)]的表达。结果DR组患者FBG、FINS、TC及TG水平均高于对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。DR组患者外周血中miR-3197相对表达量(2.76±0.67)高于对照组(1.03±0.34),差异有统计学意义(P<0.05)。DR组患者miR-3197与FBG、FINS、TC及TG水平均呈正相关(r=0.672、0.587、0.511、0.423,均为P<0.05)。ROC曲线图显示,其曲线下面积为0.919,敏感度与特异度分别为85.11%与89.36%。与NG组相比,HG组细胞凋亡率、cleaved-caspase3、Bax、TNF-α、IL-6、p-IκBα及p-p65蛋白表达量均显著增加(均为P<0.05);与HG+anti-miR-NC组相比,HG+anti-miR-3197组细胞凋亡率、cleaved-caspase3、Bax、TNF-α、IL-6、p-IκBα及p-p65蛋白表达量均显著降低(均为P<0.05)。结论miR-3197在DR患者外周血和高糖诱导的hRMEC中高表达,下调miR-3197可减轻高糖诱导的hRMEC凋亡及炎性损伤,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。