基于小鼠谱系追踪的围着床期子宫内膜上皮-间质转化探究OACSTPCD

目的利用Ltf cre Rosa26^(mT/mG)小鼠模型,进行围着床期子宫内膜上皮-间质转化(EMT)的谱系追踪研究,寻找子宫内膜EMT的直接形态学证据。方法收集8周龄雌性Ltf cre Rosa26^(mT/mG)小鼠子宫组织进行冰冻切片,分别与上皮细胞、间质细胞、免疫细胞的标志物E-cadherin、Vimentin、CD45共染后,激光共聚焦荧光显微镜(confocal)观察成像。围着床期研究:8周龄的Ltf cre Rosa26^(mT/mG)雌鼠与可育雄鼠按1:1合笼,以见栓当日上午为0.5 dpc,收集2.5 dpc、3.5 dpc、4.0 dpc、4.5 dpc的小鼠子宫进行冰冻切片,分析胚胎种植对子宫内膜EMT的影响。雌孕激素序贯刺激模型:8周龄的雌性Ltf cre Rosa26^(mT/mG)小鼠进行卵巢切除术,2周后进行雌激素(E_(2))、孕激素(P 4)序贯刺激,在不同处理后收集小鼠子宫组织,分析雌孕激素对子宫内膜EMT的影响。结果Ltf cre Rosa26^(mT/mG)小鼠子宫内膜间质中零星分布着增强绿色荧光蛋白阳性(EGFP+)细胞,与E-cadherin、Vimentin、CD45共染后,confocal结果显示,部分EGFP+细胞表现为Vimentin+,这部分Vimentin+EGFP+细胞即为由上皮细胞EMT形成的间质细胞。围着床期研究:围着床期中,与2.5 dpc、4.0 dpc相比,3.5 dpc时子宫内膜间质中EGFP+细胞个数显著降低(P<0.01)。雌孕激素序贯刺激模型:与卵巢切除后相比,E_(2)刺激后间质中EGFP+细胞数量显著降低,休息2 d后间质中EGFP+细胞数量显著增加,P 4刺激后间质中EGFP+细胞数量又显著降低(P<0.05)。结论子宫内膜中存在上皮细胞EMT形成的间质细胞,子宫内膜EMT在非胚胎植入时期就已经存在,且受到雌孕激素的严格调控。