西藏芫根中总多糖含量测定方法及单糖指纹图谱研究OACSTPCD

目的建立测定西藏芫根中总多糖含量的紫外光谱法,以及单糖的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法采用紫外分光光度法,以D-无水葡萄糖为对照品,以5%苯酚-硫酸为显色剂,于484 nm波长处测定6批样品中总多糖含量。采用柱前衍生HPLC法建立单糖的指纹图谱,色谱柱为Ultimate XB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-pH为6.8的0.1%磷酸盐溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为250 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.0版),建立6批芫根药材单糖的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,与对照品比对进行共有峰指认。结果D-无水葡萄糖质量浓度在1.84~18.37 mg/L范围内与吸光度线性关系良好(r=0.9995,n=6),精密度、重复性、稳定性试验结果的RSD均小于2.0%;平均加样回收率为100.88%,RSD为1.00(n=6)。6批样品中总多糖的平均含量为285.48 mg/g。单糖HPLC指纹图谱共识别出19个共有峰,确定峰14为半乳糖、峰4为D-甘露糖、峰7为鼠李糖、峰16为阿拉伯糖、峰13为D-无水葡萄糖、峰10为D-葡萄糖醛酸、峰12为D-半乳糖醛酸;相似度为0.946~1.000。结论该方法操作简便、结果稳定可靠,可用于西藏芫根中总多糖的质量控制与评价。