高渗环境调控钙黏蛋白表达并影响拟胚体分化OA北大核心CSTPCD

目的:渗透压对拟胚体(embryoid body,EB)分化的确切影响尚不明确,本研究旨在探讨增加渗透压对EB分化的影响,及该过程与钙黏蛋白之间潜在的联系。方法:本研究使用聚乙二醇300来增加培养液的渗透压,在高渗透压和常规培养液下培养EB。实验设计包括对照组、实验组(高渗组)、不同浓度的聚乙二醇300处理组和高渗+抑制剂组,采用Western blot、RT-qPCR、AM/PI染色、CCK-8、免疫细胞化学染色等检测方法,对EB的细胞活力及上皮钙黏蛋白(E-cadherin,CDH1)和神经钙黏蛋白(N-cadherin,CDH2)、三胚层标志物以及多能性标志物的表达进行了分析。结果:高渗不影响EB的细胞活力。在实验组和对照组的EB中,钙黏蛋白CDH1和CDH2的表达显示出显著差异,但无明显的上皮间质转化转变趋势。实验组中CDH2的表达显著下调,并且与渗透压变化呈现明显相关性。此外,在高渗组中,相较于对照组,EB的多能性标志物在第2~5天表达显著提高。同时,高渗组中胚层标志物的表达量明显增加,而外胚层标志物呈现下调趋势。本研究使用SB431542特异性抑制TGF-β信号上调CDH2表达,结果显示高渗组EB的中胚层和外胚层标志物的表达趋势发生了逆转。结论:当渗透压较高时,会促进EB中胚层的分化效率,这一过程可能与渗透压引起的CDH1和CDH2变化相关。