TRIM25通过EZH2介导巨噬细胞M2极化促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖迁移和侵袭OACSTPCD

目的:探讨TRIM25和EZH2在食管鳞状细胞癌(ESCC)相关巨噬细胞浸润中的作用及其可能的作用机制。方法:利用佛波酯诱导THP-1为M0巨噬细胞,将其与转染处理后的KYSE510细胞共培养,收集共培养巨噬细胞,分为Ctrl组、sh-NC组、sh-TRIM25组、sh-NC+oe-NC组、sh-TRIM25+oe-NC组、sh-NC+oe-EZH2组和sh-TRIM25+oe-EZH2组。收集共培养上清液,将其加入KYSE510细胞中,分为Ctrl组、TAM组、sh-NC+TAM组、sh-TRIM25+TAM组、sh-NC+oe-NC+TAM组、sh-TRIM25+oe-NC+TAM组、sh-NC+oe-EZH2+TAM组和sh-TRIM25+oe-EZH2+TAM组。qPCR法和WB法检测细胞中TRIM25、EZH2和Arg-1表达,放线菌酮蛋白合成抑制实验检测细胞EZH2蛋白稳定性,FCM检测F4/80+CD206+巨噬细胞比例,CCK-8法、克隆形成实验和Transwell实验分别检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果:KYSE510细胞中TRIM25和EZH2 mRNA和蛋白表达均高于人食管鳞状上皮细胞HET-1A(P<0.01)。与sh-NC组和sh-NC+oe-NC组相比,sh-TRIM25组和sh-TRIM25+oe-NC组F4/80+CD206+巨噬细胞比例和Arg-1蛋白表达均降低(P<0.05),sh-NC+oe-EZH2组则升高(P<0.05)。与sh-NC+TAM组和sh-NC+oe-NC+TAM组相比,sh-TRIM25+TAM组和sh-TRIM25+oe-NC+TAM组KYSE510细胞活力、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数均降低(P<0.05),sh-NC+oe-EZH2+TAM组则升高(P<0.05)。敲低TRIM25可通过抑制EZH2蛋白半衰期,降低EZH2蛋白稳定性。过表达EZH2可部分逆转sh-TRIM25对巨噬细胞和KYSE510细胞的影响。结论:TRIM25通过促进EZH2蛋白稳定性诱导巨噬细胞M2极化,从而促进ESCC细胞增殖、迁移和侵袭。