基于骨骼肌线粒体动力学探讨健脾清化方对高脂饮食诱导的肥胖小鼠胰岛素敏感性的影响OACSTPCD

目的:观察健脾清化方对高脂饮食诱导的肥胖模型小鼠(DIO)胰岛素敏感性的影响,并基于骨骼肌线粒体动力学讨论其作用机制。方法:将30只小鼠随机分为正常组(NOR组,n=6)和模型对照组(n=24),NOR组小鼠予正常饲料喂养。MOD组小鼠利用高脂饲料诱导建立C57BL/6J肥胖模型。将18只造模成功小鼠随机分为模型组(MOD组)、健脾清化方组(JPQH组)、二甲双胍组(MET组),每组6只,分别予生理盐水、健脾清化方(1.3g/mL)、二甲双胍(30 mg/mL)进行干预。干预6周后,称量小鼠体质量,检测空腹胰岛素(FINS)、胰岛素敏感性、葡萄糖耐量,反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测小鼠骨骼肌有丝分裂融合蛋白1(Mfn1)mRNA、有丝分裂融合蛋白2(Mfn2)mRNA、视神经萎缩蛋白1(Opa1)mRNA、动力相关蛋白1(Drp1)mRNA、线粒体分裂蛋白1(Fis1)mRNA表达水平,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测Mfn1、Mfn2、Opa1、Fis1、Drp1、肌球蛋白重链(MYH)蛋白表达水平。结果:干预1周后,JPQH组小鼠体质量低于MOD组(P<0.05);干预2、3、4、5、6周后,JPQH组小鼠体质量与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05);干预2、3、4、5、6周后,MET组小鼠体质量低于MOD组(P<0.05);干预1周后,MET组小鼠体质量与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。JPQH组小鼠FINS水平低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。IPITT试验中,JPQH组小鼠各时间点血糖水平均低于MOD组(P<0.05);JPQH组小鼠0 min血糖水平高于MET组(P<0.05);JPQH组小鼠30、60、90、120 min血糖水平与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05);JPQH组曲线下面积AUC低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。OGTT试验中,JPQH组小鼠0 min血糖水平与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05),JPQH组小鼠30、60、90、120 min血糖水平均低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05);JPQH组曲线下AUC低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。JPQH组小鼠Mfn1 mRNA相对表达量低于MOD组(P<0.05),高于MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Mfn2 mRNA相对表达量高于MOD组、MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Opa1 mRNA相对表达量低于MOD组(P<0.05),高于MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Fis1 mRNA相对表达量高于MOD组(P<0.05),低于MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Drp1 mRNA相对表达量与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。JPQH组小鼠Mfn1、Mfn2蛋白相对表达量高于MOD组、MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Opa1、Fis1蛋白相对表达量低于MOD组、MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Drp1蛋白相对表达量与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05);JPQH组小鼠MYH蛋白相对表达量低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾清化方可以降低高脂饮食诱导的肥胖小鼠体质量,改善小鼠的胰岛素敏感性,降低胰岛素抵抗;健脾清化方可能通过影响骨骼肌线粒体动力学进而改善骨骼肌胰岛素抵抗,以稳定血糖。