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麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶D246A异源表达及性质表征OA北大核心CSTPCD

中文摘要

以大型真菌灵芝中的麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶(MGAM)为研究对象,采用同源序列比对、同源模建、底物对接和定点突变等方法成功构建酶活力显著降低的突变体D246A.酶学性质表征结果表明:最适反应温度由野生型(wild type,WT)的65℃减少至60℃,突变体耐热能力下降;最适pH值由WT的6.0升高至7.0,有利于工程菌生长;半衰期由WT的2.0 h下降至1.5 h,酶稳定性降低.酶动力学结果表明:突变体D246A酶动力学曲线符合Michaelis方程,与WT相比,K_(m)值变大,表明酶与底物亲和力下降;V_(max)约降低至原来的1/4.

高雨晴;董钢印;张洪瑞;马占山;方丽;詹冬玲;

吉林农业大学食品科学与工程学院,长春130118 吉林农业大学生物质活性成分研究与高附加值农产品实验室,长春130118

生物学

定点突变异源表达性质表征麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶

《吉林大学学报(理学版)》 2024 (003)

P.742-749 / 8

吉林省自然科学基金(批准号:20230101262JC).

10.13413/j.cnki.jdxblxb.2023325

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