理冲汤对卵巢癌荷瘤小鼠的免疫调节及抗肿瘤作用OACSTPCD

目的探讨理冲汤对卵巢癌荷瘤小鼠的免疫调节及抗肿瘤作用。方法按随机数字表法将48只C57BL/6雌性小鼠随机分为空白组8只和造模组40只。采用腋下注射ID8细胞方法制备卵巢癌荷瘤小鼠模型。造模成功的40只小鼠随机分为模型组、紫杉醇组[10 mg/(kg·3 d)]、理冲汤低剂量组[17.89 g/(kg·d)]、理冲汤中剂量组[35.78 g/(kg·d)]和理冲汤高剂量组[71.56 g/(kg·d)],每组8只。空白组及模型组灌胃蒸馏水[10 mL/(kg·d)]。每组干预21 d。计算抑瘤率及脏器指数,HE染色观察肿瘤组织病理形态变化;流式细胞术检测脾脏中CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)细胞亚群比例;流式微球阵列技术检测血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Wnt家族成员-1(Wnt family member-1,Wnt-1)、β-连环蛋白(β-catenin)、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、白细胞分化抗原4(cluster of differentiation 4,CD4)、白细胞分化抗原8(cluster of differentiation 8,CD8)蛋白表达水平;RT-PCR法检测肿瘤组织Wnt-1、β-catenin、GSK-3β、叉头蛋白P3(forkheadbox protein 3,Foxp3)mRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组脾脏指数及血清中TNF-α、IL-2水平显著降低(P<0.01),血清中IL-6、IL-10水平及脾脏中CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞亚群比例显著升高(P<0.01)。与模型组比较,理冲汤各剂量组脾脏指数升高(P<0.05,P<0.01),各治疗组肿瘤指数显著降低(P<0.01)。模型组小鼠肿瘤组织病理形态学病变显著,各治疗组干预后均有一定程度改善。与模型组比较,各治疗组脾脏中CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞亚群比例及血清IL-10水平显著降低(P<0.01);紫杉醇组和理冲汤中剂量组TNF-α水平升高(P<0.05);理冲汤高剂量组TNF-α、IL-2水平升高(P<0.01),IL-6水平降低(P<0.05)。与模型组比较,理冲汤各剂量组肿瘤组织中GSK-3β、CD4蛋白的表达升高(P<0.05,P<0.01),Wnt-1、MMP-9蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);理冲汤中、高剂量组CD8蛋白表达显著升高(P<0.01),β-catenin蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,各治疗组GSK-3βmRNA表达水平升高(P<0.05,P<0.01),Wnt-1、β-catenin、Foxp3 mRNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论理冲汤具有抑制卵巢癌荷瘤小鼠肿瘤生长的作用,该作用可能与降低CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞亚群比例,提高机体免疫,调节Wnt/β-catenin信号通路有关。