越橘提取物对RPE细胞氧化损伤和血管生成的抑制作用OA

目的:探讨越橘提取物对视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞氧化损伤和血管生成的抑制作用。方法:①将人RPE细胞(ARPE-19)分为对照组、模型组、越橘提取物组,模型组给予0.5 mmol/L3-吗啉代亚胺(3-morpholinosydnonimine,SIN-1)处理24 h,越橘提取物组给予10ng/mL越橘提取物处理1h后,再给予0.5 mmol/L SIN-1处理24 h。细胞活性检测法(Cell Counting Kit-8,CCK-8)测定各组细胞活性,流式细胞术检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。②将人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)分为对照组、模型组、越橘提取物组,模型组给予10 ng/mLVEGF处理8 h,越橘提取物组给予10 ng/mL越橘提取物处理12 h后,再给予10 ng/mLVEGF处理8 h。划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,管腔形成实验检测细胞血管生成情况。结果:①越橘提取物在质量浓度≤10 ng/mL对ARPE-19细胞无明显毒性。给予SIN-1处理后,ARPE-19细胞活性明显降低,而预孵10 ng/mL越橘提取物可使细胞活性恢复接近至正常(P<0.001),后续实验均选用该浓度。同时,越橘提取物可降低SIN-1诱导的ARPE-19细胞内ROS水平(P<0.0001)。②给予VEGF处理后,HUVEC细胞迁移和侵袭能力增强,而预孵越橘提取物可使细胞迁移和侵袭能力减弱(P<0.0010)。同时,越橘提取物可抑制VEGF诱导的HUVEC细胞小管形成(P<0.0001)。结论:越橘提取物具有较强的抗氧化能力和抗血管生成活性,为其作为潜在治疗年龄相关性黄斑变性治疗药物提供了科学依据。