伊春森林猪源植物乳杆菌P1M1株的鉴定及生物学特性研究OACSTPCD

[目的]研究伊春森林猪源植物乳杆菌的生物学特性,全面评价其在益生菌制剂开发方面的应用潜力。[方法]对分离自黑龙江省伊春市健康森林猪粪便的1株乳酸菌(P1M1株)进行生化鉴定,利用细菌16S rDNA序列PCR扩增及测序技术进行分子生物学鉴定。绘制菌株生长曲线及产酸曲线,评价菌株对酸(pH值为2.0、3.0、4.0)和胆盐(浓度为0.15%和0.30%)的耐受性,考查菌株对13种抗菌药物的敏感性及其对猪源金黄色葡萄球菌的抑制作用,测定菌株的自由基清除能力及胞外多糖产量,评价菌株对小鼠的安全性。[结果]结合生化鉴定结果和分子生物学鉴定结果,将P1M1株鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,L.plantarum)。L.plantarum P1M1株具有糖酵解能力;培养2~10 h为对数生长期,18 h后培养基pH值稳定在3.8~3.9;在pH值为2.0、3.0、4.0条件下的3 h存活率分别为(48.97±0.61)%、(64.19±0.94)%、(78.44±1.36)%,在0.15%和0.30%胆盐浓度下的3 h存活率分别为(53.86±1.14)%、(32.87±0.75)%;对红霉素、恩诺沙星、诺氟沙星、妥布霉素、氨苄西林、阿莫西林、头孢哌酮、头孢拉定、头孢他啶敏感;对猪源金黄色葡萄球菌表现出明显的抑制作用;无细胞上清液对DPPH自由基、羟自由基、ABTS自由基的清除率分别为(91.65±1.44)%、(87.32±0.22)%、(89.79±0.59)%,均显著(P<0.05)高于完整细胞菌悬液;胞外多糖产量为(796.73±2.43)mg/L;小鼠连续灌胃L.plantarum P1M1株2周后,未见死亡及器官病变。[结论]森林猪源L.plantarum P1M1株进入对数生长期快,具有糖酵解特性和较强的产酸能力,耐受酸和胆盐,对多种抗菌药物敏感,可抑制猪源金黄色葡萄球菌生长,抗氧化能力强,胞外多糖产量高,对小鼠具有安全性,可作为益生菌制剂开发的候选菌株。