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基于线粒体钙稳态探讨血府逐瘀汤对冠心病血瘀证模型大鼠的作用机制OACSTPCD

中文摘要

目的基于线粒体钙稳态探讨血府逐瘀汤治疗冠心病血瘀证的作用机制。方法150只SD大鼠随机均分为正常组、假手术组(只穿线不结扎)、模型组、阿托伐他汀钙组(0.90 mg/kg·d,以下简称他汀组)以及血府逐瘀汤低、中、高剂量组[3.51、7.02、14.04 g/(kg·d),以下简称低、中、高剂量组],每组6只。除正常组和假手术组外,其他组均通过结扎大鼠冠状动脉左前降支制备冠心病血瘀证模型,造模成功24 h后灌胃给药,连续灌胃7 d,取各组大鼠左室缺血区心肌组织。HE染色观察样本坏死病变情况;线粒体钙离子探针检测线粒体内钙离子的荧光强度;定磷法检测心肌细胞Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性;免疫组织化学检测心肌组织线粒体钙单向转运蛋白(mitochondrial calcium uniporter,MCU)、心肌肌浆网钙离子ATP酶(sarco/sndoplasmic reticulum Ca^(2+)-ATPase 2a,SERCA2a)、瞬时受体电位通道3(transient receptor potential canonical 3,TRPC3)、钙释放激活钙通道1(calcium release-activated calcium channel protein 1,ORAI1)、半胱氨酸(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)-3、Caspase-9的蛋白表达。结果与正常组相比,模型组大鼠心肌组织可见细胞排列紊乱,横纹模糊,大量心肌细胞坏死,线粒体Ca^(2+)平均荧光强度、MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-3、Caspase-9的AOD值明显升高(P<0.01),Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性、SERCA2a的AOD值明显下降(P<0.01);与模型组相比,他汀组以及血府逐瘀汤各剂量组,心肌细胞水肿程度减轻,炎性细胞浸润减少,细胞排列相对紧密,细胞病理损伤程度有所缓解,他汀组以及血府逐瘀汤各剂量组的SERCA2a的AOD值显著上升(P<0.01),线粒体Ca^(2+)平均荧光强度、MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-9的AOD值显著下降(P<0.05,P<0.01),血府逐瘀汤各剂量组的Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性显著上升(P<0.05,P<0.01)以及Caspase-3的AOD值显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论血府逐瘀汤可以调控冠心病血瘀证模型大鼠心肌线粒体钙离子转运,调节心肌细胞线粒体钙稳态,可能与上调SERCA2a的蛋白表达,下调MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-3、Caspase-9的蛋白表达相关。

黄舒淳;张秋雁;杨漾;李静;匡慧芳;王明韵;

湖南中医药大学,湖南长沙410208

中医学

血府逐瘀汤冠心病血瘀证线粒体钙超载

《湖南中医药大学学报》 2024 (006)

P.951-959 / 9

湖南省教育厅科学研究重点项目(21A0253);湖南中医药大学2022年度学科建设“揭榜挂帅”项目(22JBZ005);湖南中医药大学中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地开放基金项目(21PTKF1012);湖南中医药大学2021年度中医学一流学科(2021ZYX35)。

10.3969/j.issn.1674-070X.2024.06.004

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