RANBP9调控TGF⁃β诱导结肠癌Colo320细胞凋亡的机制研究OA北大核心CSTPCD

目的探讨Ran蛋白微管组织中心结合蛋白(RANBP9)靶向调控转化生长因子β1(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)的表达,及其对结直肠癌Colo320细胞凋亡的影响。方法分析TCGA数据库中625例结肠癌组织以及20例正常结肠组织中RANBP9的表达数据,KMPLOT分析RANBP9的表达与结肠癌患者生存期的关系。人类蛋白免疫组化数据库分析TGF⁃β1在正常结肠组织和结肠癌组织中的表达情况,使用UALCAN数据库分析TGF⁃β1的表达与结肠癌患者生存期的关系。双荧光素酶实验分析RANBP9和TGF⁃β1的关系。将pcDNA3.1⁃GFP⁃RANBP9和pcDNA3.1⁃GFP⁃RANBP9⁃NC分别转染至实验组和对照组细胞中,转染完成后细胞常规培养,另设立正常组细胞,不经过转染操作,常规培养;噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)法检测各组细胞的生长活力,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,JC⁃1染色检测各组细胞的线粒体膜电位,Western blot检测各组细胞中RANBP9和TGF⁃β1的表达。结果RANBP9在结肠癌组织中的表达明显降低,与RANBP9表达低的患者相比,RANBP9高表达的结肠癌患者具有较高的生存期曲线,TGF⁃β1在结肠癌组织的表达明显升高,与TGF⁃β1表达高的患者相比,TGF⁃β1低表达的患者具有较高的生存期曲线,差异均具有统计意义(P<0.05)。在结肠癌中,RANBP9能靶向调控TGF⁃β1的表达。与正常组细胞相比,实验组细胞的生长活力、线粒体的膜电位、TGF⁃β1的表达明显下调,细胞的凋亡率和RANBP9的表达明显升高,差异均具有统计意义(P<0.05)。结论RANBP9能靶向调控TGF⁃β1的表达,促使结肠癌细胞Colo320的生长活力和线粒体膜电位下降,诱导其凋亡。