红花CtbZIP47基因的表达分析及调控酵母油脂合成的作用OA北大核心CSTPCD

为明确CtbZIP47在酵母油脂合成中的作用,通过采用在线软件对红花CtbZIP47蛋白进行生物信息学分析;采用PCR方法扩增CtbZIP47基因cDNA序列;采用qRT-PCR方法检测该基因的表达情况;选择同源重组的方法构建pCAMBIA1302-CtbZIP47植物表达载体,利用激光共聚焦显微镜观察其在细胞中的定位情况;同时构建pPICZαA-CtbZIP47酵母表达载体,测定酵母中的油脂含量。结果表明:CtbZIP47蛋白由129个氨基酸编码组成;根据qRT-PCR结果显示,CtbZIP47基因在种子成熟后期表达量逐渐升高;通过生物信息学分析该蛋白为亲水性蛋白,具有核定位信号;亚细胞定位结果显示其定位在细胞核中;成功构建重组酵母表达载体pPICZαA-CtbZIP47,测定转基因酵母菌株的油脂含量,其含量显著高于毕赤酵母菌株和转空载体的毕赤酵母菌株。可见CtbZIP47基因在酵母油脂合成过程中起作用。