基于AMPK/SIRT1通路探究苦参碱对阿尔茨海默病Aβ_(25-35)诱导PC12细胞氧化损伤和凋亡的影响OA北大核心CSTPCD

目的探讨苦参碱对阿尔茨海默病β-淀粉样蛋白(Aβ)_(25-35)诱导PC12细胞凋亡和氧化损伤的影响,并分析其与AMP活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子(SIRT1)通路的作用机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度苦参碱对PC12细胞生长的影响,最终选择0.5、1.0和1.5 mmol/L苦参碱进行实验。将PC12细胞分为Con组(空白培养细胞),Aβ25-35组(20μmol/L的Aβ_(25-35)处理细胞),Aβ_(25-35)+Matrine-L组、Aβ_(25-35)+Matrine-M组、Aβ_(25-35)+Matrine-H组(20μmol/L的Aβ_(25-35)和0.5 mmol/L、1.0 mmol/L、2.0 mmol/L苦参碱处理细胞)。用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)含量,酶联免疫吸附法检测超氧化的物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,Western blotting检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、AMPK/SIRT1通路相关蛋白表达。结果与Con组相比,Aβ_(25-35)组24 h、48 h的吸光度(OD)值、Bcl-2蛋白表达、SOD和GSH-Px活性均降低,凋亡率、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达、ROS含量、IL-6、IL-1β、TNF-α表达增加,p-AMPK、SIRT1蛋白表达上调(均P<0.05);与Aβ_(25-35)组相比,Aβ_(25-35)+Matrine-L组、Aβ_(25-35)+Matrine-M组、Aβ_(25-35)+Matrine-H组24 h、48 h的OD值、Bcl-2蛋白表达、SOD和GSH-Px活性增加(P<0.05),凋亡率、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达、ROS含量、IL-6、IL-1β、TNF-α表达降低,p-AMPK、SIRT1蛋白表达下调(P<0.05)。结论苦参碱可能通过抑制AMPK/SIRT1通路激活,减轻Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞凋亡和氧化损伤。