MiR-650通过靶向结合磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1促进口腔鳞状细胞癌细胞增殖和糖酵解OACSTPCD

目的:分析miR-650是否靶向磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1(PCK1)促进口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖和糖酵解。方法:生物信息学筛选出差异表达且与细胞增殖、糖酵解有关的基因。构建稳定过表达PCK1的CAL-27和Tca8113细胞系,分成Vector组和PCK1组。构建稳定过表达miR-650的OSCC细胞,分成miR-NC组、miR-650组和miR-650+PCK1组。CCK-8和克隆形成检测各组细胞增殖能力。裸鼠成瘤实验检测瘤体质量、体积。免疫组织化学检测肿瘤组织中PCK1表达水平。免疫印迹测定各组细胞PCK1蛋白表达水平。葡萄糖和乳酸试剂盒检测各组细胞内葡萄糖和乳酸变化。数据库预测PCK1靶标,双荧光酶素报告实验进行验证。RT-qPCR测定转染后OSCC细胞中miR-650的表达。结果:PCK1在OSCC中表达下调,且与细胞增殖和糖酵解相关。与Vector组相比,PCK1组中PCK1蛋白水平升高;过表达PCK1抑制细胞增殖;过表达PCK1抑制裸鼠移植瘤体积和质量增长;过表达PCK1促进细胞葡萄糖产生和抑制其消耗,同时抑制乳酸产生。与癌旁组织相比,miR-650在OSCC中表达上调。数据库预测及双荧光酶素报告实验证实miR-650与PCK1的靶向关系。与miR-NC组相比,miR-650组中PCK1 mRNA和蛋白表达水平明显降低。miR-650通过调节PCK1表达,促进OSCC细胞增殖,调控细胞糖酵解。结论:miR-650可以通过靶向结合PCK1促进OSCC细胞增殖和糖酵解。