基于UPLC-ESI-LTQ-Orbitrap-MS结合网络药理学及动物实验探讨益气活血汤对缺血性脑卒中的作用OA北大核心CSTPCD

目的 基于超高效液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱(UPLC-ESI-LTQ-Orbitrap-MS)、网络药理学和动物实验探讨益气活血汤对缺血性脑卒中(IS)的作用.方法 采用UPLC-ESI-LTQ-Orbitrap-MS技术分析益气活血汤潜在活性化合物,并基于TCMSP和SwissTargetPrediction数据库对化合物靶点进行预测;从GeneCards等数据库检索IS疾病相关靶点,与化合物靶点取交集获得关键靶点,建立潜在活性化合物-靶点调控网络和蛋白互作网络(PPI),并对关键靶点进行GO和KEGG分析.建立大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠模型,观察大鼠神经功能缺损、血清IL-6、IL-1β、TNF-α、VEGF和MMP-9水平及脑梗死率情况,采用HE染色法观察大鼠脑组织病理变化,并通过蛋白免疫印迹法分析大鼠脑组织中相关蛋白的表达.结果 共筛选出益气活血汤潜在活性化合物 37 个,作用靶点598 个,与8 953 个IS疾病靶点取交集后获得关键靶点 499 个.KEGG分析表明,关键靶点主要富集于PI3K/Akt等信号通路.动物实验表明,益气活血汤可改善MCAO大鼠神经功能缺损症状,减少脑梗死率,抑制炎性反应,改善脑组织病理形态,同时上调p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt的相对表达.结论 益气活血汤可通过多成分、多途径、多靶点抑制炎性反应,调节PI3K/Akt信号通路中关键蛋白表达发挥治疗IS的作用.