胞质TGM2依赖GTP抑制TRIM21介导的STAT1泛素化降解促进胃癌恶性进展OACSTPCD
背景 与目的既往研究提示谷氨酰胺转胺酶2(transglutaminase 2,TGM2)是多种肿瘤的潜在治疗靶点,但其在胃癌中的作用及机制尚未明确.本研究中,我们试图揭示TGM2在胃癌中的作用和相关机制.方法 分析TGM2在胃癌细胞和组织中的表达水平,并通过一系列体内外实验分析TGM2在胃癌中的功能,包括蛋白质印迹、免疫组化、CCK8、集落形成实验、transwell实验、异种移植瘤模型和转移瘤模型.通过基因富集分析、定量PCR和蛋白质印迹筛选TGM2在胃癌中潜在的作用靶标.通过功能损益实验和挽救实验验证TGM2对STAT1的调控作用.通过免疫共沉淀、质谱分析、定量PCR和蛋白质印迹筛选STAT1互作蛋白,并阐明其调控机制.最后,通过突变TGM2和使用TGM2的酶活性调节剂(ZM39923和A23187)以明确TGM2通过何种酶活性促进胃癌恶性进展,并阐明其潜在机制.结果 研究结果表明TGM2在胃癌组织中高表达,与病理分级密切相关,其高表达预示患者不良预后.TGM2过表达/敲低能够促进/抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭.而敲低/过表达STAT1能够逆转TGM2在胃癌细胞中的作用.进一步分析提示TGM2通过抑制STAT1泛素化/降解促进胃癌恶性进展.TRIM21被鉴定为胃癌中STAT1的E3泛素连接酶.TGM2通过与GTP结合的酶活性促进TRIM21和STAT1解离.A23187能够抑制TGM2对STAT1的作用,并在体外和体内实验中逆转TGM2的促肿瘤作用.结论 本研究揭示了在胃癌中TGM2调控STAT1的作用和机制,提示TGM2可作为胃癌治疗的潜在靶点,了解TGM2与GTP结合的酶活性有助于开发靶向药物,优化现有治疗策略.
张璐;李清雅;杨静;徐鹏晖;宣哲;徐江浩;徐泽宽
南京医科大学第一附属医院普外科,南京 210029,江苏,中国南京医科大学第一附属医院普外科,南京 210029,江苏,中国||江苏省肿瘤生物标志物及防治重点实验室,南京医科大学肿瘤个体化医学协同创新中心,南京 211166,江苏,中国
TGM2STAT1TRIM21泛素化降解胃癌
《癌症》 2024 (004)
150-176 / 27
本研究得到国家自然科学基金(81802996、81871946和82072708)、国家科学技术基础研究专项基金(2019FY101104)、南京医科大学第一附属医院创新研究项目、江苏省高等教育机构重点学科建设项目(JX10231801)、江苏省医学重点学科(普通外科学)(ZDXKA2016005)、江苏省肿瘤生物标志物及防治重点实验室、南京医科大学肿瘤个体化医学协同创新中心的支持.
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